真菌由来天然物を用いた非アルコール性脂肪肝炎 (NASH) の新たな治療戦略の構築

使用真菌衍生的天然产物开发非酒精性脂肪性肝炎 (NASH) 的新治疗策略

• 批准号: 22K20897
• 负责人: 山口 智亮
• 金额: $ 1.5万
• 依托单位: Showa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-08-31 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K20897/
• 关键词: 非アルコール性脂肪肝炎; 内皮型一酸化窒素合成酵素; HepG2細胞; 線維化

非アルコール性脂肪肝炎 (NASH) はしばしば脂質異常症や糖尿病に合併する進行性の病態であり、肝硬変に移行した場合原則として根治治療は望めない。現在のところ肝硬変や肝細胞癌への進展抑制効果を示した治療薬はなく、NASH の進行を抑制する新規薬剤の開発が求められている。近年、NASH の発症にともない肝臓内の一酸化窒素（NO)による肝保護が消失し、結果として病態が難治化することが指摘されている。これまでの検討で真菌の培養上清から soluble epoxide hydrolase の phosphatase 活性化阻害作用を持つ化合物 #27 を見出した。phosphatase 活性阻害作用により 一酸化窒素合成酵素（eNOS）活性化が引き起こされることが報告されており、化合物 #27 が NASH の進行を抑制することが予想される。本研究では、化合物 #27 の NASH に対する効果を検討することを目的とした。令和 4 年度は、NASH に対する化合物 #27 の抗炎症効果について検討した。12 週齢において、NASH モデルマウスの炎症性サイトカインはピークアウトしており、通常のマウスと比較して有意な変化は認められず、#27 の抗炎症作用の評価には適さないことが判明した。8週齢において、炎症性サイトカインの変化を確認し、#27 の抗炎症作用の評価を実施中である。in vitro 実験では、ヒト肝癌由来細胞株 HepG2細胞に遊離脂肪酸を負荷し、24時間培養したものをNAFLD/NASH モデルとして使用した。MTTアッセイにて #27 の至適濃度を決定した。Oil Red O 染色にて、遊離脂肪酸負荷による細胞内脂質蓄積の有意な上昇を認めたが、#27 処理により上昇は抑制された。

非酒精性脂肪变性（NASH）是一种进行性疾病，通常与血脂异常和糖尿病有关，从原则上讲，如果发生肝硬化，则不建议自由基治疗。目前，尚无治疗表现出抑制肝硬化或肝细胞癌进展的作用，并且有必要开发抑制NASH进展的新药物。近年来，已经指出，随着NASH的发作，肝脏中一氧化氮（NO）引起的肝脏保护消失了，导致棘手的状况。先前的研究是在真菌培养上清液中进行的，化合物＃27具有可溶性环氧化物水解酶的磷酸酶激活的抑制作用。据报道，磷酸酶活性抑制一氧化氮合酶（ENOS）的激活，预计化合物＃27会抑制NASH的进展。这项研究旨在研究化合物＃27对NASH的影响。在2022年，检查了化合物27对NASH的抗炎作用。在12周龄时，NASH模型小鼠中的炎症细胞因子峰达到峰值，与正常小鼠相比未观察到显着变化，并且发现不适合评估＃27的抗炎作用。在8周龄时，正在确认炎症细胞因子的变化，并评估＃27的抗炎作用。在体外实验中，将游离脂肪酸加载到人肝癌衍生的细胞系HEPG2细胞中，并将培养24小时用作NAFLD/NASH模型。在MTT测定中确定了＃27的最佳浓度。油红O染色显示由于游离脂肪酸载荷引起的细胞内脂质积累显着增加，但＃27治疗抑制了这种增加。