免疫チェックポイント分子 (CTLA-4) の作用から探る新規歯周治療の確立

基于免疫检查点分子（CTLA-4）作用的新型牙周治疗方法的建立

• 批准号: 22K21071
• 负责人: 小谷地 咲
• 金额: $ 1.83万
• 依托单位: Tokyo Dental College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-08-31 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K21071/
• 关键词: CTLA-4; 歯槽骨吸収; 破骨細胞分化; 歯周炎

歯周病は多因子性疾患であることから，病態の理解や根治的な治療法の確立は困難を極めている。我々は，歯周病の病態解明と新規治療法の開発のため，免疫チェックポイント機構と歯周病の関連について検討を行ってきた。その成果として，免疫チェックポイント分子の一つである細胞傷害性Tリンパ球関連抗原4 (CTLA-4) が破骨細胞分化を抑制し，歯周炎マウスモデルにおける歯槽骨吸収量を減少させることを明らかにした。しかし，そのメカニズムについては未だ不明な点が多い。そこで本研究は，CTLA-4の詳細な破骨細胞分化調節メカニズムの検討と，局所応用を行った際の歯周組織破壊への影響の評価を行い，新規歯周治療の開発の足掛かりとすることを目的とした。2022年度は，CD80/86－/－マウスにおいてCTLA-4が歯槽骨吸収に及ぼす影響を評価するため，まずは野生型を用いて絹糸結紮歯周炎マウスモデルの確立を行った。また、in vitroではPP2A発現抑制下での，CTLA-4の破骨細胞分化への影響を評価した。siRNAを用いてPP2A発現を抑制したRAW 264.7細胞に，RANKLとCTLA-4-Igを添加した。添加後48時間，96時間で，qRT-PCRにて破骨細胞分化マーカー (Macrophage-colony stimulating factor, Carbonic anhydrase II, Cathepsin K, Tartrate-resistant acid phosphatase) 発現を評価した。siRNA 導入は細胞生存率に有意な影響を与えないことを確認した。PP2A siRNA 群では，CTLA-4-Ig 添加によるCathepsin K, Trap の発現抑制は確認されなかった。これより，PP2A 発現の調節は，CTLA-4-Ig による破骨細胞分化抑制メカニズムの一つであることが示唆された。

歯 weeks disease は multiple factor disease で あ る こ と か ら, pathological の の established は difficult understand や radical な therapy を extremely め て い る. I 々 は 歯 weeks disease の pathological interpret と の open new rules therapy 発 の た め, immune チ ェ ッ ク ポ イ ン ト institutions と 歯 weeks disease の masato even に つ い て 検 line for を っ て き た. そ の results と し て, immune チ ェ ッ ク ポ イ ン molecules ト の つ で あ る harmful T リ ン パ ball masato even antigen 4 (CTLA - 4) が を inhibiting osteoclast differentiation し, 歯 periarthritis マ ウ ス モ デ ル に お け る 歯 収 uptake osseous を reduce さ せ る こ と を Ming ら か に し た. Youdaoplaceholder5 だ が, そ メカニズムに メカニズムに メカニズムに て て て だ not だ unknown な points が many な. そ こ で は, CTLA 4 の detailed な osteoclast differentiation regulation メ カ ニ ズ ム の 検 for と, bureau 応 line with を っ た interstate の 歯 tissues broken 壊 へ の の appraisal of 価 を い, new rules 歯 weeks treatment の open 発 の foot hanging か り と す る こ と を purpose と し た. 2022 annual は, CD80/86 - / - マ ウ ス に お い て CTLA 4 が 歯 bone absorption 収 に and ぼ す を appraisal of 価 す る た め, ま ず は wild-type を with い て silk si ligation 歯 periarthritis マ ウ ス モ デ ル の line established を っ た. Youdaoplaceholder0, in vitroで た PP2A inhibition で <s:1>, CTLA-4 <s:1> osteoclast differentiation へ <e:1> effects を comments 価 た た siRNAを inhibits <s:1> たRAW 264.7 cells に with を てPP2A, RANKLとCTLA-4-Igを adds た. After adding 48 time, 96 time で qRT-PCRにて osteoclast differentiation カ カ カ (Macrophage-colony stimulating factor, Carbonic anhydrase II, Cathepsin K) Occurrence of Tartrate-resistant acid phosphatase を comment 価 た. The effect of siRNA introduction on <s:1> cell survival rate に intentional な is confirmed to be を and えな た とを とを とを. PP2A siRNA group で で, CTLA-4-Ig added によるCathepsin K, Trap <s:1> inhibition による confirmed されな った った. こ れ よ り, PP2A 発 の adjust は, CTLA - 4 - Ig に よ る inhibiting osteoclast differentiation メ カ ニ ズ ム の a つ で あ る こ と が in stopping さ れ た.

项目成果

The potential mechanism of CTLA-4-Ig-mediated osteoclast differentiation

CTLA-4-Ig介导破骨细胞分化的潜在机制

• 发表时间: 2022
• 作者: Saki Nakane-Koyachi;Kentaro Imamura;Tasuku Murakami;Rio Hisanaga;Kazuyuki Ishihara;Atsushi Saito
• 通讯作者: Atsushi Saito