アストロサイト局所カルシウムシグナルの解析

星形胶质细胞局部钙信号分析

• 批准号: 24800029
• 负责人: 繁冨 英治
• 金额: $ 1.91万
• 依托单位: University of Yamanashi
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-08-31 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-24800029/
• 关键词: アストロサイト; アデノ随伴ウイルスベクター; GECI

本年度は、カルシウム感受性タンパク質（genetically encoded calcium indicator、以下GECI）を用いてアストロサイト選択的にカルシウムイメージングを行う実験系の導入と構築を行った。膜移行型GECI、Lck-GCaMP3を用いてアストロサイト特異的に発現させるために必要な試薬、アデノ随伴ウイルスベクター（AAV）は現在作成中であり、近日中に利用可能となる。この実験を行うための実験設備は最適化し終わり、AAVが入手されればすぐに実験を始められる予定である。このAAVコンストラクトは前所属先で作成されたものであるが、このコンストラクトを用いた論文が掲載された後に、使用許可が得られるように話を進めていた。しかし、この論文の掲載の受理に至るまで、追加実験が必要となったため、当初の計画を少し変更し、その追加実験を研究課題の一部として行った。AAVを用いた遺伝子導入は、導入の際に起こる脳への物理的障害及びAAVによる感染がアストロサイトの細胞内カルシウム動態に影響する懸念が指摘されたが、コントロール実験によりこの懸念は払拭され少なくとも我々の実験プロトコールでは問題ないことが証明された。これらの成果は、The Journal of General Physiology誌に印刷中で、近日中に掲載予定である。AAVを用いたGECIの発現系と同時に遺伝子改変動物を用いた実験系を進めた。Flx-GCaMP3マウス (Ai38, Jackson laboratory)及びGlast-CreERT2マウスを学内動物施設に導入し、現在安定して系統維持が出来ている状況である。両方の動物を交配した得られる、アストロサイト特異的にGECI、GCaMP3を発現するマウスの最初の産仔が得られており、2013年4月より実験に供する予定となっている。

This year, the introduction and construction of a genetically encoded calcium indicator (hereinafter GECI) system was carried out. The membrane transition type GECI, Lck-GCaMP3 can be used in the development of special applications. This is the first time that we've been able to optimize our equipment, and we've been able to do this. The AAV has been created in advance, and the AAV has been created in advance, and the AAV has been created in advance. This paper is a part of the research project, which includes the acceptance of papers, the addition of information, the revision of original plans, and the addition of information. AAV is used in the introduction of genetic material, the introduction of genetic material, the initiation of genetic material, the impact of genetic material on the intracellular dynamics of AAV infection, the identification of genetic material, and the identification of genetic material. The Journal of General Physiology is published in print. AAV is used in the development of GECI, and the development of animal husbandry is also carried out. Flx-GCaMP3 (Ai38, Jackson laboratory) and Glast-CreERT2 were introduced into the animal facilities in the school, and now the stability of the system has been maintained. In April 2013, the first birth of the GECI and GCaMP3 was scheduled.

项目成果

アストロサイトTRPA1チャネルの局所カルシウムシグナル調節

星形胶质细胞 TRPA1 通道的局部钙信号调节

• 作者: 横山寛;南部功夫;井澤淳;和田安弘;貴田啓子;Eiji Shigetomi;Xiaoping Tong;Eiji Shigetomi;繁冨英治;加藤総夫;繁冨英治
• 通讯作者: 繁冨英治

アストロサイト局所カルシウム流入とシナプス可塑性

星形胶质细胞局部钙流入和突触可塑性

• 作者: Kohei Suenaga;Hiroyoshi Sekine;and;Ichiro Hasuo and Kohei Suenaga;潮由美子,森下安子;Masri Selma;堅田明子;福島直美;宮崎充功;Eiji Shigetomi;Kawakatsu et al;小野 悠介;Eiji Shigetomi;小野 悠介;繁冨英治
• 通讯作者: 繁冨英治

Imaging calcium microdomains within entire astrocyte territories and endfeet with GCaMPs expressed using adeno-associated viruses.

• DOI: 10.1085/jgp.201210949
• 发表时间: 2013-05
• 期刊: The Journal of general physiology
• 作者: Shigetomi E;Bushong EA;Haustein MD;Tong X;Jackson-Weaver O;Kracun S;Xu J;Sofroniew MV;Ellisman MH;Khakh BS
• 通讯作者: Khakh BS

医学のあゆみ

医学史

• 发表时间: 2022
• 作者: 藤田陽子;野田岳志
• 通讯作者: 野田岳志

実験医学

实验医学

• 发表时间: 2011
• 作者: 松田憲之;尾勝圭;田中啓二
• 通讯作者: 田中啓二