新生児期遺伝子治療におけるアデノ随伴ウイルスベクターの体内動態と治療効果

腺相关病毒载体在新生儿基因治疗中的生物动力学和治疗效果

• 批准号: 17659328
• 负责人: 久米 晃啓
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659328/
• 关键词: 遺伝子治療; ウィルス; 先天代謝異常; 新生児; トランスレーショナルリサーチ; ウイルスベクター; アデノ随伴ウイルス

[目的]古典型フェニルケトン尿症(PKU)をモデルに、アデノ随伴ウイルス(AAV)ベクターによる遺伝子治療法を開発している。今年度は、これまでの基礎検討に基づき、治療用遺伝子であるフェニルアラニン水酸化酵素(PAH)遺伝子を搭載したAAVベクターをPKUモデルマウスに投与して、AAV8型キャプシド、および自己相補型ゲノムの採用による効率改善を解析した。[結果](1)成体PKUマウスにおいて、対照のAAV5/PAHは、雄PKUマウスでは1×10^<13>particles(pc)以上で長期間、雌PKUマウスでは1×10^<14>pcで一過性に血中フェニルアラニン(Phe)を正常化した。これに対しAAV8/PAHは、雄では1×10^<12>pcで長期間、雌では1×10^<14>pcで一過性にPheを正常化した。すなわち、AAV8はAAV5に比べ10倍以上効率が高かった。(2)自己相補型AAV8/PAHは、雄では1×10^<11>pcでPheを正常化した。雌では1×10^<12>pcで正常化、1×10^<11>pcでも長期間Pheを治療域に低下させた。ゲノムの自己相補型化による効率改善も10倍以上だつた。(3)新生仔PKUマウスに自己相補型AAV8/PAHベクターを投与した。肝への5×10^<11> pc直接注入ではPheの低下は見られなかった。2×10^<12>pc静注後1-2ヶ月は血中Pheの低下傾向が見られたが(無治療個体の20mg/dL以上に対し15mg/dL程度)、それ以降は無治療レベルになった。[考察]AAV8型キャプシドと自己相補型ゲノムの組合せにより、成体PKUマウスに対しては、従来型AAV5ベクターに比べて100倍以上の効率改善を達成し、これまで治療の困難だつた雌でも十分な効果が得られた。しかし新生仔マウスにおいては有意な治療効果が得られず、さらなるベクター改良が必要と考えられた。

[objective] Classical antidromic diabetes mellitus (PKU) is associated with chronic diabetes mellitus (AAV), which is accompanied by clinical treatment. This year, we will use some drugs to improve the analysis rate of water acidifying enzymes (PAH), such as AAV, PKU, AAV8, AAV8, and so on, this year. [results] (1) Adult PKU test, AAV5/PAH test, male PKU test 1 × 10 ^ & lt;13>particles (pc) over a long period of time, female PKU test 1 × 10 ^ & lt;14> PCA through the normalization of Phe in sexual blood. Pay attention to AAV8/PAH, male sex 1 × 10 ^ & lt;12>pc for a long period of time, female 1 × 10 ^ & lt;14> PC to normalize sexual Phe. The rates of "AAV8" and "AAV5" are more than 10 times higher than those of "normal". (2) self-matched AAV8/PAH, male, 1 × 10 ^ & lt;11>pc Phe normalization. Female 1 × 10 ^ & lt;12>pc normalization, 1 × 10 ^ & lt;11>pc long-term Phe treatment domain is low. The rate of self-styling has been improved by more than 10 times. (3) newborns PKU

项目成果

Prevention of diabetic retinopathy by intraocular soluble flt-1 gene transfer in a spontaneously diabetic rat model.

• DOI: 10.3892/ijmm.19.1.75
• 发表时间: 2007
• 期刊: International journal of molecular medicine
• 影响因子: 5.4
• 作者: J. Ideno;H. Mizukami;A. Kakehashi;Yuka Saito;T. Okada;M. Urabe;A. Kume;M. Kuroki;M. Kawakami;S. Ishibashi;K. Ozawa

A histone deacetylase inhibitor enhances recombinant adeno-associated virus-mediated gene expression in tumor cells.

• DOI: 10.1016/j.ymthe.2005.11.010
• 发表时间: 2006-04
• 期刊: Molecular therapy : the journal of the American Society of Gene Therapy
• 作者: T. Okada;Ryosuke Uchibori;Mayumi Iwata-Okada;Masafumi Takahashi;T. Nomoto;M. Nonaka-Sarukawa;Takayuki Ito;Yuhe Liu;H. Mizukami;A. Kume;E. Kobayashi;K. Ozawa

Removal of empty capsids from type 1 adeno-associated virus type vector stocks by anion-exchange chromatography potentiates transgene expression

通过阴离子交换层析从 1 型腺相关病毒型载体库存中去除空衣壳可增强转基因表达

• 发表时间: 2006
• 期刊: Molecular Therapy (印刷中)
• 作者: Urabe M;et al.
• 通讯作者: et al.

Large-scale production of recombinant viruses by use of a large culture vessel with active gassing.

使用具有主动通气功能的大型培养容器大规模生产重组病毒。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Hum. Gene Ther. 16
• 作者: Okada;T.;Nomoto;T.;Yoshioka;T.;Nonaka-Sarukawa;M.;Ito;T.;Ogura;T.;Iwata-Okada;M.;Uchibori;R.;Shimazaki;K.;Mizukami;H.;Kume;A.;Ozawa;K.
• 通讯作者: K.

Scalable generation ofg high-titer recombinant adeno-associated virus type 5 in insect cells

在昆虫细胞中大规模生产高滴度重组腺相关病毒 5 型

• 发表时间: 2006
• 期刊: Journal of Virology 80・4
• 作者: Urabe M;et al.
• 通讯作者: et al.