概日時計タンパク質CRYの機能を調節する低分子化合物

一种调节生物钟蛋白CRY功能的小分子化合物

基本信息

  • 批准号:
    26891011
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 0.92万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
  • 财政年份:
    2014
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2014-08-29 至 2015-03-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

本研究では、時計タンパク質CRYの安定性を変化させる新規の化合物を同定し、それをプローブとしてCRYの機能調節機構を解明することを目指す。そのために本年度は化合物スクリーニング系のセットアップを行った。CRY1とルシフェラーゼの融合タンパク質であるCRY1-LUCを安定発現するHEK293細胞を用い、申請者が発見したCRYを安定化する化合物KL001の効果を指標に細胞数、培地量、化合物添加のタイミング、処理時間などを検討し、384ウェルプレートを用いたアッセイ条件を最適化した。化合物処理によるCRY1-LUCの蓄積量の変化を用いたエンドポイントアッセイとすることで、半減期を測定するよりも手順を簡略化し、ハイスループット化への目途をつけた。コントロールとしてLUCを安定発現する細胞を用い、化合物がルシフェラーゼに与える影響を評価することで、CRYに対する作用を明らかにする。さらに名古屋大学トランスフォーマティブ生命分子研究所の化合物ライブラリーセンターと共同で、384ウェルプレートに対応した細胞分注機およびプレートリーダーを導入した。現在、化合物投与に用いる微量分注機をセットアップしているところである。機器の準備が整い次第、化合物ライブラリーセンターが所有する化合物のうち1万種類をスクリーニングし、CRYの発現量を増加あるいは減少させる化合物がどの程度の頻度で出現するかを見積もる予定である。
The purpose of this study is to determine the stability of CRY, to determine the same level of new chemical compounds, and to verify that the mechanical energy management agency of CRY is responsible for the identification of new chemical compounds. This year, the compound is in the department of medicine. CRY1 was used to stabilize HEK293 cells. The applicant saw that the compound KL001 was stabilized by CRY. It refers to the number of cells, the amount of soil, the addition of the compound, the temperature and time of the compound, and the optimal conditions for the use of KL001. The chemical composition of the compound was measured by CRY1-LUC. The chemical reaction was measured in the first half of the year. The effect of LUC diazepam has been shown to be sensitive to the use of cells, compounds and compounds, and the effects of CRY have a clear effect. Nagoya University

项目成果

期刊论文数量(8)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
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  • DOI:
  • 发表时间:
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  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Hirota;T.
  • 通讯作者:
    T.
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2015
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Furukawa;A.;Maejima;T.;Matsumura;S.;Ikawa;Y.;鈴木智也・東城幸治;廣田 毅
  • 通讯作者:
    廣田 毅
Kay-Hirotaグループ ホームページ
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  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
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