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Involvement of ubiquitin system on the hepatitis B virus X protein (HBx)-mediated transactivation activity

泛素系统参与乙型肝炎病毒 X 蛋白 (HBx) 介导的反式激活活性

基本信息

批准号：
17590274
负责人：
TOKUNAGA Fuminori
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Osaka City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17590274/
关键词：
protein enzyme virus transcription 蛋白質

项目摘要

We have identified an RING-IBR-RING (RBR) family ubiquitin ligase, HOIL-1L, as a predominant intracellular isoform of HOIL-1 (heme-oxidized IRP2 ligase-1). HOIL-1L forms a high molecular mass (〜600 kDa) complex with HOIP (HOIL-1L-interacting protein) in vivo. HOIP also belongs to RBR family, and the HOIL-1L/HOIP complex exhibits ubiquitin polymerization activity in vitro. To examine the physiological function of HOIL-1L/HOIP, we first screened the effect of HOIL-1L/HOIP on transcriptional activity, since HOIL-1 has shown to bind protein kinase C and hepatitis B virus X protein, and both of them affect transcription. Then, we found by luciferase reporter assay that combined expression of HOIL-1L and HOIP, but not by single expression of respective ligase, specifically induced NF-KB activation. Indeed, co-expression of HOIL-1L/HOIP caused intranuclear translocation of p65 and p50, and enhanced phosphorylation of IKBa. Using various domain-deleted mutants, we identified that the RING domains of HOIP played a crucial role on the NF-KB activation. Notably, a dysfunctional RING-finger mutant of HOIP inhibited TNF-a-and TAK1-mediated NF-KB activation, but had no effect on NIK-mediated NF-KB activation. These results indicate that HOIL-1L/HOIP activates canonical NF-KB pathway through the ubiquitin ligase activity of HOIP. The ligase complex may have a pivotal role on the inflammation, anti-apoptosis, and immune system through the regulation of NF-KB pathway.

我们已经确定了一个RING-IBR-RING （RBR）家族泛素连接酶，HOIL-1L，作为HOIL-1（血红素氧化IRP2连接酶-1）的主要细胞内亚型。HOIL-1L在体内与HOIP （HOIL-1L相互作用蛋白）形成高分子量（~ 600 kDa）复合物。HOIP也属于RBR家族，并且HOIL-1L/HOIP复合物在体外表现出泛素聚合活性。为了研究HOIL-1L/HOIP的生理功能，我们首先筛选了HOIL-1L/HOIP对转录活性的影响，因为HOIL-1已被证明可以结合蛋白激酶C和乙型肝炎病毒X蛋白，并且两者都影响转录。然后，我们通过荧光素酶报告基因实验发现，HOIL-1L和HOIP联合表达，而不是单独表达各自的连接酶，特异性地诱导NF-KB激活。事实上，HOIL-1L/HOIP的共表达导致了p65和p50的核内易位，并增强了IKBa的磷酸化。利用各种结构域缺失突变体，我们发现HOIP的RING结构域在NF-KB激活中起着至关重要的作用。值得注意的是，HOIP的功能失调环指突变体抑制tnf -a和tak1介导的NF-KB激活，但对nik介导的NF-KB激活没有影响。这些结果表明，HOIL-1L/HOIP通过HOIP的泛素连接酶活性激活NF-KB通路。连接酶复合物可能通过调节NF-KB通路在炎症、抗凋亡和免疫系统中发挥关键作用。

项目成果

期刊论文数量（12）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Characterization of endoplasmic reticulum-associated degradation of a protein S mutant identified in a family of quantitative protein S deficiency.

在定量蛋白 S 缺陷家族中鉴定的蛋白 S 突变体的内质网相关降解的表征。

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Thromb.Res. (in press)
影响因子：
0
作者：
Hitomi HAYABUCHI;Manami HISANO;Yasuko MATSUNAGA;Yasumi Kimura;Ohnaka Keizo;Tsuda Hiroko
通讯作者：
Tsuda Hiroko

A ubiquitin ligase complex assembles linear polyubiquitin chain

泛素连接酶复合物组装线性多泛素链