新規人工RNA結合タンパク質の革新的デザイン法の開発とその有効性の検証

开发新型人工RNA结合蛋白的创新设计方法并验证其有效性

• 批准号: 22H02200
• 负责人: 世良 貴史
• 金额: $ 11.15万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H02200/
• 关键词: RNA; タンパク質

生体内では、多種多様な生命現象が、様々な仕組みを駆使して、遺伝情報を正しい場所で、適切な時期に、必要な量巧妙に読み出すことにより精密に制御されている。このことは、この遺伝情報の読み出しを生物とは独立に制御できるようになれば、遺伝子の発現調節や加工などを介して、発生、分化、老化などの生命現象の解明やガン、遺伝病などの疾患の治療法の開発につながり、学術、健康・福祉、経済、社会など幅広い分野での多大な貢献が期待される。そのための一つのアプローチとして、標的の遺伝情報、すなわちゲノムDNAやmRNAの特定の標的配列に結合できる人工タンパク質を創出できれば、この人工タンパク質単独、あるいはこのタンパク質に別の機能ドメインを連結した融合タンパク質を用いて、標的の様々な生命現象を望むように制御することが可能となる。当研究室ではこれまで、セントラルドグマにおける、DNA情報の読み取りを制御すべく、ゲノム上の標的DNA配列に結合する人工DNA結合タンパク質を独自に開発し、これまでガンなどの遺伝子発現やウイルスゲノム切断によるウイルスの不活性化などを実現してきた。そこで、本研究では、セントラルドグマのもう一つの重要なRNA情報の読み取りを制御すべく、新規の人工RNA結合タンパク質の開発を目指している。そのため、本年度では、これまでの知見に基づき、各種タンパク質をデザインした。当該遺伝子を大腸菌発現ベクターにクローニングした後、形質転換した大腸菌で発現量・可溶化条件を検討した。これら条件を最適化し、各目的タンパク質を大量発現させ、溶菌した後、精製し、濃度を測定した。得られたタンパク質の各標的RNA配列への結合力や特異性を検証し、比較・検討した。

In the body, a variety of health equipment, a variety of life indicators, the staff of the staff to make sure that the market is in place, cut the time limit, and use the necessary quantity to make the precise control of the system. The health, differentiation, aging, health, health, health and well-being, health and well-being The size of the society is different, how big it is, and how big it is. In the first place, you need to know that you are in a bad situation, that you are in love with each other, that you are in a different situation, that you are in a situation where you can use the combination of DNA, mRNA, and so on, that you can use the information you need to make sure that you are not alone. Your life is like looking out and controlling your life. When the laboratory is in operation, the system is in good condition, and the DNA system is used to control the system. The combination of the artificial DNA and the artificial DNA is used in the laboratory. In the laboratory, the artificial DNA is used in combination with the artificial DNA, and the system is used alone. In this study, it is necessary to improve the performance of key RNA systems. In combination with artificial RNA, new rules and regulations are used to control the operation of the system. Please be informed that you will be informed of this year's program, this year's program, and all kinds of training programs. When the bacteria show signs of dissolving, the conditions for solubility of the bacteria are different. The conditions are optimized, and a large number of samples are detected for each purpose. After the bacteriolysis, the precision is determined, and the temperature is determined. It is necessary to make sure that the RNA of each person is assigned to the combination of specific information and specific information.