Conservation of genetic resources of ayu via cryopreservation and surrogate broodstock

通过冷冻保存和替代亲鱼保护香鱼遗传资源

• 批准号: 22H02419
• 负责人: 市田 健介
• 金额: $ 10.82万
• 依托单位: Tokyo University of Marine Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H02419/
• 关键词: 生殖細胞移植; 凍結保存技術; アユ; 凍結保存

本研究では群馬県水産試験場の群馬系アユをモデルとし、アユにおける代理親魚技法樹立のための条件検討を行った。代理親魚技法におけるドナーおよび宿主の移植適齢期を推定するため、ドナーとして群馬系アユ若魚を、宿主として海産系アユ仔魚を経時的にサンプリングし、HE染色による生殖腺の組織学解析を行った。また、F群馬系アユ精巣の緩慢凍結保存に用いる適切な凍結保護剤とその濃度を探索した。さらに、海産系アユ仔魚腹腔内へ群馬系アユ凍結生殖細胞を移植し、宿主生殖腺への生着の成否を検証した。組織学的解析の結果、ドナーとなる群馬系アユの生殖腺は生後4か月齢までは未分化生殖細胞が増殖していたが、その後急激に分化が始まった。このことから4か月齢がドナー適齢期と判断した。また、生殖細胞の緩慢凍結の条件検討の結果から、1.3M DMSOが凍結保護剤として最適であることを明らかにした。さらに、宿主となる海産系の生殖腺の発達状況から、その移植適齢期は孵化後8-10日齢であることが推定された。各日齢の宿主を用いた生殖細胞移植実験の結果、ドナー生殖細胞の宿主生殖腺への生着効率は10日齢で82.1±3.9%, 平均生着細胞数3.16±0.75細胞という最も高い値がみられ、宿主生殖腺の組織学的解析の結果と一致した。以上、シラス型仔魚期を有するアユの生殖細胞の凍結・移植条件が至適化された。

This study was conducted to investigate the conditions for the establishment of broodstock techniques in the field of fish breeding. The histological analysis of gonads by HE staining was carried out for the estimation of the suitable time for transplantation of fish and host in the breeding stock. In addition, we explored the appropriate freeze protectants and concentrations for slow freezing storage of F Group Horse's aged sperm. In the past, the fish and the horse have lost frozen germ cells in the abdominal cavity, and the success of the host gonad has been verified. Histological analysis showed that the gonads of the horse were undifferentiated and undifferentiated after 4 months of reproduction. 4 months ago, the judge decided that it was time to go to work. 1.3M DMSO was the most suitable cryoprotectant. The gonad development status of the host and marine strain is different from that of the host. The suitable time for transplantation is 8-10 days after hatching. The results of germ cell transplantation in different days showed that the reproductive rate of germ cells and host gonads was 82.1± 3.9% in 10 days, and the average number of reproductive cells was 3.16±0.75. The histological analysis of host gonads was consistent. The freezing and transplantation conditions of germ cells in the larval stage were optimized.

项目成果

アユ代理親魚技術の構築

香鱼代理亲鱼技术构建

• 发表时间: 2023
• 作者: R Fujihara;N Katayama;Sadaie;S.;Miwa;M.;Sanchez Matias;G. A.;Ichida;K.;... & Yoshizaki;G.;西原 輝・住吉竹千代・出口 華・安本信哉・近藤昌和・河野智哉・酒井正博・引間順一;市田健介,鈴木弘貴,天野雄一,山川宏樹,松下芳之,丸山瑠太,阿久津崇,渡辺峻,塩澤佳奈子,鈴木究真,吉崎悟朗
• 通讯作者: 市田健介,鈴木弘貴,天野雄一,山川宏樹,松下芳之,丸山瑠太,阿久津崇,渡辺峻,塩澤佳奈子,鈴木究真,吉崎悟朗

抗生殖細胞抗体を利用した免疫学的不妊化技術の検討

使用抗生殖细胞抗体的免疫灭菌技术的检验

• 发表时间: 2023
• 作者: Keita Sameshima;Aya Yokose;Yoshiki Sato;Takumi Adachi;Kai Ehara;Otto Baba;Tatsuki Yoshinaga;Fumiya Furukawa.;川口航世・原田七輝・渡邉美香・岡村 洋・河野智哉・酒井正博・引間順一;高瀬研志,市田健介,小祝敬一郎,吉崎悟朗,廣野育生,近藤秀裕
• 通讯作者: 高瀬研志,市田健介,小祝敬一郎,吉崎悟朗,廣野育生,近藤秀裕

Gametogenesis commencement in recipient gonads using germ cells retrieved from dead fish

使用从死鱼中回收的生殖细胞在受体性腺中开始配子发生

• DOI: 10.1016/j.aquaculture.2022.737952
• 发表时间: 2022
• 期刊: Aquaculture,
• 作者: F Yang;K Ichida;G Yoshizaki.
• 通讯作者: G Yoshizaki.

Production of Germ Cell-Less Rainbow Trout by dead end Gene Knockout and their Use as Recipients for Germ Cell Transplantation

• DOI: 10.1007/s10126-022-10128-w
• 发表时间: 2022-04-05
• 期刊: MARINE BIOTECHNOLOGY
• 影响因子: 3
• 作者: Fujihara, Ryo;Katayama, Naoto;Yoshizaki, Goro
• 通讯作者: Yoshizaki, Goro

ニジマス生殖腺におけるstm遺伝子の発現解析

虹鳟性腺中stm基因的表达分析

• 发表时间: 2023
• 作者: Keita Sameshima;Aya Yokose;Yoshiki Sato;Takumi Adachi;Kai Ehara;Otto Baba;Tatsuki Yoshinaga;Fumiya Furukawa.;川口航世・原田七輝・渡邉美香・岡村 洋・河野智哉・酒井正博・引間順一;高瀬研志,市田健介,小祝敬一郎,吉崎悟朗,廣野育生,近藤秀裕;市田健介,三輪美砂子,吉崎悟朗
• 通讯作者: 市田健介,三輪美砂子,吉崎悟朗