Development of novel method for visualizing fish spermatogonia using transferrin receptor

开发利用转铁蛋白受体可视化鱼类精原细胞的新方法

• 批准号: 21K19138
• 负责人: 市田 健介
• 金额: $ 3.83万
• 依托单位: Tokyo University of Marine Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-07-09 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21K19138/
• 关键词: 生殖細胞移植; 細胞表面抗原; 生体染色; トランスフェリン; A型精原細胞; ヘテロな発現; トランスフェリン受容体; 精原細胞移植

申請者らはニジマスESTライブラリーにおけるin silico解析およびRT-PCR解析にて、ニジマストランスフェリン受容体1(tfr1)がA型精原細胞の膜表面で発現していることをこれまでに明らかにしている。そこで本分子の特性を用いて蛍光標識トランスフェリンおよび蛍光標識鉄をA型精原細胞に取り込ませることによる生体染色の樹立を最終目標として、昨年度は実際にtrf1のニジマス精巣および精巣細胞に対しての発現解析を行った。今年度は、発現解析でポリクローナル抗体を作成し、得られたtfr1抗体を用いてニジマス精巣細胞を酵素分散した生細胞に対して染色した結果、一部のA型精原細胞のみをヘテロに染色することが明らかとなった。また生体染色を行うためにトランフェリンに蛍光色素のAcidiFluor ORANGEを標識した蛍光トランスフェリンを用いて、ニジマス精原細胞の染色を試みたが、ニジマス生殖細胞特異的、あるいはtfr1抗体と一致する形のシグナルは得られなかった。しかしながら、tfr1抗体を用いて染色した一部のＡ型精原細胞をセルソーターを用いて分取し、ニジマス孵化稚魚に対する移植実験を行った結果、tfr1抗体陽性のＡ型精原細胞は抗体陰性のＡ型精原細胞と比較して高い値を示し、tfr1は生着能の高い細胞を標識できる可能性が示唆された。

Applicant: ESTライブラリーにおけるin silico analysis およびRT-PCR analysis にて, ニジマストランスフェリン acceptor 1 ( tfr1) The surface of the membrane of type A spermatogonia is exposed. The characteristics of this molecule are that it can be marked with light, and it can be used to mark type A spermatogonia. The establishment of body chromosomes is the ultimate goal, and the analysis of the last year's last year's trf1 is fine. This year, we will analyze the production of でポリクローナル antibody and the use of られたtfr1 antibody using いてニジマス sperm cell enzyme The results of staining of scattered raw cells and the staining of type A spermatogonia were stained. AcidiFluor ORANGE logo is used for staining spermatogonia using いて and ニジジマス spermatogonia. , ニジマス germ cell-specific, あるいはtfr1 antibody and the same する-shaped のシグナルは got られなかった.しかしながら, tfr1 antibody を stained with いてしたのＡ type spermatogonia をセルソーターを Use いて to divide し, ニジマス hatching juvenile fish に対する transplant 実験を行った results, tfr1 antibody-positive type A spermatogonia and antibody-negative type A spermatogonia are compared, and tfr1 produces high-energy cells, which is a sign of possibility.

项目成果

抗生殖細胞抗体を利用した免疫学的不妊化技術の検討

使用抗生殖细胞抗体的免疫灭菌技术的检验

• 发表时间: 2023
• 作者: Keita Sameshima;Aya Yokose;Yoshiki Sato;Takumi Adachi;Kai Ehara;Otto Baba;Tatsuki Yoshinaga;Fumiya Furukawa.;川口航世・原田七輝・渡邉美香・岡村 洋・河野智哉・酒井正博・引間順一;高瀬研志,市田健介,小祝敬一郎,吉崎悟朗,廣野育生,近藤秀裕
• 通讯作者: 高瀬研志,市田健介,小祝敬一郎,吉崎悟朗,廣野育生,近藤秀裕

Production of Germ Cell-Less Rainbow Trout by dead end Gene Knockout and their Use as Recipients for Germ Cell Transplantation

• DOI: 10.1007/s10126-022-10128-w
• 发表时间: 2022-04-05
• 期刊: MARINE BIOTECHNOLOGY
• 影响因子: 3
• 作者: Fujihara, Ryo;Katayama, Naoto;Yoshizaki, Goro
• 通讯作者: Yoshizaki, Goro

生殖細胞移植を用いたメコンオオナマズの配偶子生産

利用生殖细胞移植在湄公河巨型鲶鱼中生产配子

• 发表时间: 2021
• 作者: 市田健介;Rangsung Duangkaew;Surintorn Boonanuntanasarn;吉崎悟朗
• 通讯作者: 吉崎悟朗

アユ代理親魚技術の構築

香鱼代理亲鱼技术构建

• 发表时间: 2023
• 作者: R Fujihara;N Katayama;Sadaie;S.;Miwa;M.;Sanchez Matias;G. A.;Ichida;K.;... & Yoshizaki;G.;西原 輝・住吉竹千代・出口 華・安本信哉・近藤昌和・河野智哉・酒井正博・引間順一;市田健介,鈴木弘貴,天野雄一,山川宏樹,松下芳之,丸山瑠太,阿久津崇,渡辺峻,塩澤佳奈子,鈴木究真,吉崎悟朗
• 通讯作者: 市田健介,鈴木弘貴,天野雄一,山川宏樹,松下芳之,丸山瑠太,阿久津崇,渡辺峻,塩澤佳奈子,鈴木究真,吉崎悟朗

Gametogenesis commencement in recipient gonads using germ cells retrieved from dead fish

使用从死鱼中回收的生殖细胞在受体性腺中开始配子发生

• DOI: 10.1016/j.aquaculture.2022.737952
• 发表时间: 2022
• 期刊: Aquaculture,
• 作者: F Yang;K Ichida;G Yoshizaki.
• 通讯作者: G Yoshizaki.