5-ALA産生乳酸菌の作製とその家畜用ワクチンプラットホームとしての可能性

产 5-ALA 乳酸菌的生产及其作为牲畜疫苗平台的潜力

• 批准号: 22H02498
• 负责人: 畑生 俊光
• 金额: $ 11.23万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2026-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H02498/
• 关键词: ５‐アミノレブリン酸; 乳酸菌; 家畜用ワクチンプラットフォーム; ５－ALA; 鶏コクシジウム; 5-アミノレブリン酸; 家畜用ワクチン

本研究年度は、①有用乳酸菌株の選択および②5-ALA産生乳酸菌の作製を目標に研究を行った。このうち、①について約20日齢の白色レグホーン種幼雛および約500日齢のロードアイランドレッド種成鶏雌腸管より乳酸菌の分離を試みた。腸管内容物は滅菌生理食塩水で段階希釈後、シクロヘキシミドを添加した各種寒天培地にて塗抹培養した。培養は嫌気的に40℃で48時間行った。幼雛腸管内の生菌数は6.23-9.36 log CFU/gで、大腸を除いて下部にいくほど菌数が多かった（十二指腸＜空腸＜大腸＜回腸＜盲腸だった）。一方、成鶏腸管の生菌数は部位ごとの差は幼雛ほど大きくなく、8.23-9.24 log CFU/gであった。分離培地ごとの生菌数の差はそれほど見られず、明確な傾向はなかった。次に、なるべく形態の異なるコロニーを釣菌・継代培養したところ、実験①からは培養可能な幼雛および成鶏腸管由来の233および418菌株がそれぞれ得られた。そして、培養液pH < 5.0となった230および389菌株を乳酸菌の候補として選抜した。②については、プラスミド選択および遺伝子導入用乳酸菌の検討にとどまった。一方、免疫賦活効果の高いアシドフィルス乳酸菌と5-ALAの同時給与による抗コクシジウム効果の検討を行った。その結果、アシドフィルス乳酸菌単独投与時で対照群と比較して約60％のオーシスト排出抑制効果がみられたが、5-ALAをアシドフィルス菌と同時給与することにより約80％のオーシスト排出抑制効果が認められた。

In this study year, を, ① useful lactic acid bacteria strains are selected to 択および② 5-AlA-producing lactic acid bacteria <s:1> as the production を target に research を line った. こ の う ち, (1) に つ い て about 20 齢 の white レ グ ホ ー ン kinds of clutch お よ び about 500 齢 の ロ ー ド ア イ ラ ン ド レ ッ ド kind into female 鶏 insufflate よ り の separation of lactic acid bacteria を try み た. The contents of the intestinal tract are で sterilized physiological saline で after the stage of hikari, シ <s:1> ロヘキシ ドを ドを ドを with the addition of <s:1> various AGAR and AGAR にて for coating and culture た. Cultivate に at 40℃で for 48 hours at った. Chicks born inside bowel の count は 6.23 9.36 log CFU/g で, e. を except い て lower に い く ほ ど count more than が か っ た (duodenum jejunum < e. < < ileal cecum だ っ た). One party, born into 鶏 insufflate の bacteria number は parts ご と の poor は chicks ほ ど big き く な く, 8.23-9.24 log CFU/g で あ っ た. The difference in the ごと <s:1> viable bacteria count <e:1> of the isolated petri ごと それほ <e:1> is られず, and the な tendency is clearly defined な な った った. に, な る べ の く form different な る コ ロ ニ ー を fish, bacteria 継 generation, cultivate し た と こ ろ, be 験 (1) か ら は training may な chicks お よ び 鶏 insufflate origin の 233 お よ び 418 strains が そ れ ぞ れ must ら れ た. Youdaoplaceholder0 て て, culture medium pH < 5.0となった230および389 strain を lactic acid bacteria <s:1> reserve と て て て selected た. (2) に つ い て は, プ ラ ス ミ ド sentaku お よ び posthumous son 伝 import with lactic acid bacteria の beg に 検 と ど ま っ た. Side, high immune activating unseen fruit の い ア シ ド フ ィ ル ス lactobacillus と 5 - ALA の give に よ る resistance コ ク シ ジ ウ ム unseen fruit の 検 line for を っ た. そ の results, ア シ ド フ ィ ル ス 単 alone when cast with lactic acid bacteria で according to group of seaborne と compare し て about 60% の オ ー シ ス ト discharge inhibition of unseen fruit が み ら れ た が, 5 - ALA を ア シ ド フ ィ ル ス bacteria と give す る こ と に よ り about 80% の オ ー シ ス ト discharge inhibition of unseen fruit が recognize め ら れ た.