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5-ALA産生乳酸菌の作製とその家畜用ワクチンプラットホームとしての可能性

产 5-ALA 乳酸菌的生产及其作为牲畜疫苗平台的潜力

基本信息

批准号：
22H02498
负责人：
畑生俊光
金额：
$ 11.23万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2026-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

本研究年度は、①有用乳酸菌株の選択および②5-ALA産生乳酸菌の作製を目標に研究を行った。このうち、①について約20日齢の白色レグホーン種幼雛および約500日齢のロードアイランドレッド種成鶏雌腸管より乳酸菌の分離を試みた。腸管内容物は滅菌生理食塩水で段階希釈後、シクロヘキシミドを添加した各種寒天培地にて塗抹培養した。培養は嫌気的に40℃で48時間行った。幼雛腸管内の生菌数は6.23-9.36 log CFU/gで、大腸を除いて下部にいくほど菌数が多かった（十二指腸＜空腸＜大腸＜回腸＜盲腸だった）。一方、成鶏腸管の生菌数は部位ごとの差は幼雛ほど大きくなく、8.23-9.24 log CFU/gであった。分離培地ごとの生菌数の差はそれほど見られず、明確な傾向はなかった。次に、なるべく形態の異なるコロニーを釣菌・継代培養したところ、実験①からは培養可能な幼雛および成鶏腸管由来の233および418菌株がそれぞれ得られた。そして、培養液pH < 5.0となった230および389菌株を乳酸菌の候補として選抜した。②については、プラスミド選択および遺伝子導入用乳酸菌の検討にとどまった。一方、免疫賦活効果の高いアシドフィルス乳酸菌と5-ALAの同時給与による抗コクシジウム効果の検討を行った。その結果、アシドフィルス乳酸菌単独投与時で対照群と比較して約60％のオーシスト排出抑制効果がみられたが、5-ALAをアシドフィルス菌と同時給与することにより約80％のオーシスト排出抑制効果が認められた。

In this research year, the selection of useful lactic acid bacteria strains and the production of 5-ALA lactic acid bacteria were studied. In this case, the isolation of lactic acid bacteria from the female intestine was studied. The contents of the intestine are sterilized, and the physiological water is added to various cold cultures. The culture temperature is 40℃ for 48 hours. The number of bacteria in the intestine of young chicks ranged from 6.23 to 9.36 log CFU/g, and the number of bacteria in the middle and lower parts of the large intestine increased (duodenum <jejunum <ileum <cecum). The number of bacteria in a square and adult intestine is 8.23-9.24 log CFU/g. The difference in the number of bacteria isolated from the culture medium was not obvious, and the tendency was clear. In addition, there are 233 strains of different morphologies and strains of different cultures, such as 233 strains and 418 strains. The culture medium pH < 5.0 was 230 and 389. The lactic acid bacteria were selected as candidates. (2) The test of lactic acid bacteria for gene introduction is carried out in the following ways: A study on the effects of high concentration of lactic acid bacteria and 5-ALA on immunoactive mice was carried out. The results showed that when lactic acid bacteria were administered alone, about 60% of them were inhibited by 5-ALA.