The study of X chromosome inactivation maintenance in primate.
灵长类X染色体失活维持的研究。
基本信息
- 批准号:22H02539
- 负责人:
- 金额:$ 11.32万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
- 财政年份:2022
- 资助国家:日本
- 起止时间:2022-04-01 至 2027-03-31
- 项目状态:未结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本研究では、(1) カニクイザル初代培養体細胞を利用して、霊長類のXCI維持機構を解明し、次いで, (2)カニクイザル着床後胚を用いて、XCI確立から維持に至る経路を明らかにする研究を行う。本年度はCRISPR/Cas9システムを用いてXIST KO(プロモーター欠損)初代培養体細胞を作製し、これら細胞において不活性X染色体に特異的なヒストン修飾を蛍光免疫染色で解析し、XIST及びX連鎖遺伝子の発現をRNA FISH を用いてXIST KO体細胞のおけるX連鎖遺伝子の再活性化状態を解析し、XISTのXCI維持における必要性を検討した。その結果、不活性X染色体に特異的ヒストン修飾はH3K9me3以外は全て消失し、不活性化維持に必要であると報告されているSmcHD1の蓄積は維持されてていたが、X連鎖遺伝子の発現は認められなかった。これらの結果から、XISTは体細胞の不活性化X染色体の特異的ヒストン修飾維持に必要であるが、X連鎖遺伝子の発現抑制維持には必要ない事を明らかにした。さらに、XCI維持へのSmcHD1の機能を解析するために、XIST KO 体細胞のSmcHD1 をさらにKOし、同様の解析を行なった。XIST KO +SmcHD1 KO細胞で、SmcHD1の消失は確認できたが、不活性XからのX連鎖遺伝子の再発現は認めらなかった。この結果から、SmcHD1もX連鎖遺伝子の発現抑制維持には必要ない事を明らかにした。
This study で は, (1) カ ニ ク イ ザ ル original culture cells を using し て, long 霊 class の XCI keep agency を interpret し, い で, (2) カ ニ ク イ ザ ル after implantation embryo を use い て, establishment of XCI か ら maintain に to る 経 road を Ming ら か に す を line う る research. This year は CRISPR/Cas9 シ ス テ ム を with い て XIST KO (プ ロ モ ー タ ー owe loss) in the early generation of somatic を for し, こ れ ら cells に お い て not active X chromosome に specific な ヒ ス ト ン modified を 蛍 light immune analytical し, XIST and dyeing で び x-linked heritage 伝 son の 発 を RNA FISH now を with い て XIST KO somatic の お け る x-linked heritage 伝 の activation state analytical し を again, XIST の XCI maintain に お け る necessity を beg し 検 た. そ に の results, not active X chromosome specific ヒ ス ト ン modified は H3K9me3 は て all exist し, not active to maintain necessary で に あ る と report さ れ て い る SmcHD1 の accumulation は maintain さ れ て て い た が, x-linked but 伝 の 発 は now recognize め ら れ な か っ た. こ れ ら の results か ら, XIST は somatic の still active X chromosome の specific ヒ ス ト ン modifications to maintain necessary で に あ る が, x-linked but 伝 の 発 inhibit now maintain に は necessary な い matter を Ming ら か に し た. さ ら に, XCI maintain へ の SmcHD1 の function analytical す を る た め に, XIST KO somatic の SmcHD1 を さ ら に KO し, with others in line analytical を の な っ た. XIST KO +SmcHD1 KO cells で, disappearance of SmcHD1 <s:1> confirmation で たが たが たが, inactive X ら ら <s:1> x-linked progeny 伝 reappearance <s:1> recognition めらな めらな った った. The <s:1> result of ら ら and the chain reaction of SmcHD1 on X 伝 sub-products <e:1> show inhibition and maintenance of に に necessary な を events を and を ら ら に た た た た た た
项目成果
期刊论文数量(5)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
カニクイザルの発生過程におけるX染色体遺伝子量補正プログラム
食蟹猴发育过程中X染色体基因剂量校正程序
- DOI:
- 发表时间:2022
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:西田壮汰;安博洋;槇村有紗;森下文浩;今村拓也;岡本郁弘
- 通讯作者:岡本郁弘
Generation of functional oocytes from male mice in vitro
- DOI:10.1038/s41586-023-05834-x
- 发表时间:2023-03-15
- 期刊:
- 影响因子:64.8
- 作者:Murakami, Kenta;Hamazaki, Nobuhiko;Hayashi, Katsuhiko
- 通讯作者:Hayashi, Katsuhiko
Induction of fetal meiotic oocytes from embryonic stem cells in cynomolgus monkeys
- DOI:10.15252/embj.2022112962
- 发表时间:2023-03-16
- 期刊:
- 影响因子:11.4
- 作者:Gyobu-Motani, Sayuri;Yabuta, Yukihiro;Saitou, Mitinori
- 通讯作者:Saitou, Mitinori
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