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MPTPによるパ-キンソニズム発症の生化学的研究

MPTP对帕金森病发作的生化研究

基本信息

批准号：
03263102
负责人：
水上茂樹
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03263102/
关键词：
MPTP MPP^+ミトコンドリア活性酸素脂質過酸化反応

项目摘要

1.ミトコンドリアを用いた研究。(1)MPP^+によりNADH依存性O_2生成の誘導と脂質過酸化反応の増大。ウシ心筋亜ミトコンドリア粒子にMPP^+を加えると、ド-パミンニュ-ロンのミトコンドリアに存在すると思われる濃度でNADH依存性O_2生成を誘導した。O_2生成は、NADHーユビキノン還元活性がMPP^+で阻害されるのと並行した上昇した。MPP^+は、ADPーFe^<3+>存在下におけるNADH依存性脂質過酸化反応を増大させたが、コハク酸添加により抑制された。この抑制は、内在性ユビキノンの還元と相関していた。これらMPP^+によるO_2生成誘導と脂質過酸化反応の増大は、MPP^+による細胞死と関わっているものと考えられた。(2)MPP^+による脂質過酸化反応の抗NADHーユビキノン還元酵素抗体を用いた研究。パ-キンソン病の際、黒質ミトコンドリアのNADHー2ビキノン還元活性が選択的に低下しており、そのサブユニット量の低下がみられる。一方、ミトコンドリアの脂質過酸化反応により、NADHーユビキノン還元活性がまず低下することが知られている。よって、NADHーユビキノン還元酵素(ComplexI)をウシ心筋から精製し、それに対するウサギ抗体を作成した。この抗体を用いたコントロ-ル亜ミトコンドリア粒子に対するイムノブロットでは、約25本のバンドが認められたが、脂質過酸化反応を起こした粒子では、分子量約2.5万のバンドが消失していた。今後、PCー12細胞をMPP^+で処理した時のComplexIサブユニット動態について検討してゆくつもりである。2.培養ラット褐色細胞腫細胞(PCー12細胞)を用いた研究。培養PCー12細胞にMPP^+を加えると、細胞死がみられた。その半致死量は、約1mMであり、半致死時間は、約48時間であった。ユビキノンのアナログであるアバン(イデベノン)添加は、MPP^+による細胞死を抑制した。

1. Research on the application of the software. (1)MPP^+ induced NADH-dependent O_2 production and increased lipid peroxidation. The NADH-dependent O_2 production is induced by the concentration of MPP^+ in the plasma. O_2 formation, NADH production and reduction activity increased in parallel with MPP^+ inhibition. In the presence of MPP^+ and ADP ^<3+>, NADH-dependent lipid peroxidation was increased and inhibited. This is the first time that we've seen this. O_2 production, lipid peroxidation, and cell death are the main factors affecting the growth of MPP. (2)MPP^+-induced lipid peroxidation and anti-NADH-induced lipid reductase antibodies were studied. When the virus is detected, the activity of NADH-2 is reduced, and the activity of NADH-2 is reduced. In one aspect, the lipid peroxidation reaction in the presence of NADH is known to decrease. The enzyme complex I is used to purify and purify the tissue. The antibody was used in the middle of the day, and the molecular weight of the antibody was about 25,000. From now on, PC-12 cells MPP^+ processing time ComplexI 2. Culture of brown cell tumor cells (PC-12 cells) was studied. Culture PC-12 cells MPP^+, cell death The median lethal dose is about 1mM, the median lethal time is about 48 minutes. Add the cell death suppression code for MPP^+.