神経線維腫症1型(NFI)遺伝子及びその産物の機能解析

1型神经纤维瘤病（NFI）基因及其产物的功能分析

• 批准号: 04260205
• 负责人: 田中 一馬
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04260205/
• 关键词: ras p21; 酵母; 神経線維腫症1型; IRA遺伝子; GAP

出芽酵母のRAS蛋白の負制御因子の一つIRA2蛋白は、ヒトNF1蛋白質と高い相同性を示す。この2種の蛋白質は、それらの活性部位と考えられるGAPドメインの外側まで相同領域が広がっている。ira変異株は熱ショックに高感受性を示すので、この性質を利用して、IRA2遺伝子およびNF1遺伝子の機能領域を解析することが可能である。本年度は、GAPドメイン以外の領域の機能について解析を試みた。IRA2遺伝子について多種類の欠失プラスミドを構築し、ira2変異株に導入し、宿主菌の熱ショック感受性の回復を調べた。ほとんどGAPドメインだけを持つpKT16はira2変異をサプレスしたが、N末側を欠失させたpKT180(GAPドメインことC末側を持つ)はできなかった。また、C末側を欠失させたプラスミドpKF100(GAPドメインことN末側を持つ)はGAP活性を保持していた。pKT180と、N末部分だけを持ち、それ自身ではGAP活性を持たないプラスミドpKF84を同時にira2変異株に導入すると、ira2変異ガサプレスされた。上記の結果から、IRA蛋白のGAPドメインの外側はIRA蛋白の活性調節に関わること、また、その時、N末側が正に、C末側が負に働くことが予想される。GAPドメインを欠失したプラスミドpKF50は、ira2変異を相補できない。pKT180およびpKF50をそれぞれ野生株に導入すると、形質転換体は熱ショック感受性になった。この結果は、GAP活性を持たないIRA2変異型蛋白が正常なIRA2蛋白の活性を阻害するように働くことを示している。以上の結果から、IRA2蛋白とRAS蛋白の相互作用について考察した。

The <s:1> RAS protein <s:1> negative control factor <e:1> of germinating yeast <s:1> IRA2 protein and ヒトNF1 protein と are highly <s:1> similar, を shows す. The active sites of と and それら of two <s:1> proteins と are と, えられるGAPドメ <e:1>, <s:1> まで the same domain on the outer side まで, が wide がって and る る る. IRA - different strains は hot シ ョ ッ ク に high susceptibility を shown す の で, こ の nature を USES し て, IRA2 but 伝 お よ び NF1 heritage 伝 son を の function field analytical す る こ と が may で あ る. For this year, the functions of <s:1> fields <e:1> other than に, GAPドメ and に are analyzed. Youdaoplaceholder3 try みた. IRA2 posthumous son 伝 に つ い て variety の owe lost プ ラ ス ミ ド を constructing し, IRA2 - different strains に import し, host bacteria の hot シ ョ ッ ク susceptibility の reply を adjustable べ た. ほ と ん ど GAP ド メ イ ン だ け を hold つ pKT16 は ira2 - different を サ プ レ ス し た が lost, at the end of the N side を owe さ せ た pKT180 (GAP ド メ イ ン こ と C at the end of the lateral を つ) は で き な か っ た. ま た lost, at the end of the C side を owe さ せ た プ ラ ス ミ ド pKF100 (GAP ド メ イ ン こ と N side を hold つ) at the end of the activity was を は GAP し て い た. PKT180 と, N at the end of the part だ け を hold ち, そ れ itself で は GAP activity を hold た な い プ ラ ス ミ ド pKF84 を simultaneously に ira2 - different strains に import す る と, ira2 - different ガ サ プ レ ス さ れ た. Written の results か ら, IRA protein の GAP ド メ イ ン の lateral は IRA protein の activity regulating に masato わ る こ と, ま た, そ の when, at the end of the N side が に, C at the end of the side が negative に 働 く こ と が to think さ れ る. GAPドメ ド を を deficiency <s:1> たプラス ド ドpKF50 ira2 variation を complement で な な な な な. pKT180およびpKF50をそれぞれ wild plant に introduction すると, morphoplasmoid 転 transducer <s:1> heat ショッ <s:1> sensitivity になった. こ の results は, GAP activity を hold た な い IRA2 - different protein が normal な IRA2 protein の active を resistance against す る よ う に 働 く こ と を shown し て い る. The above <s:1> results て ら, IRA2 protein とRAS protein <s:1> interaction に て て て て investigation of <s:1> た.

项目成果

Tanaka,D.: "A dominant activationg mutation in the effector region of RAS abolishes IRA2 sensitivity." Mol.Cell.Biol.12. 631-637 (1992)

Tanaka,D.：“RAS 效应区的显性激活突变消除了 IRA2 敏感性。”

Matsui,Y.: "The yeast RHO3 and PHO4 genes,ras superfamily genes,are necessary for bud growth and their defect is suppressed by high dose of bud-formation genes cdc42 and BEMI." Mol.Cell.Biol.12. 5690-5699 (1992)

Matsui,Y.：“酵母 RHO3 和 PHO4 基因（ras 超家族基因）是芽生长所必需的，高剂量的芽形成基因 cdc42 和 BEMI 可以抑制它们的缺陷。”

Matsui,Y.: "Isolation and characterization of two novel ras superfamily genes in Saccharomyces cerevisiae." Gene. 114. 43-49 (1992)

Matsui,Y.：“酿酒酵母中两个新型 ras 超家族基因的分离和表征。”

Nisogi,H.: "A new essential gene of Saccharomyces cerevisiae,a defect in et may result in instability of nucleus." Exp.Cell Res.200. 48-57 (1992)

Nisogi,H.：“酿酒酵母的一个新必需基因，et 的缺陷可能导致细胞核不稳定。”

Ono,B.: "Cloning and characterization of the Cy53(CYI1)gene of Saccharomyces cerevisiae." J.Bacteriol.174. 3339-3347 (1992)

Ono,B.：“酿酒酵母 Cy53(CYI1) 基因的克隆和表征。”