RNPトランスフェクション技術を用いたネガティヴストランドRNAウイルスの研究

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インフルエンザウイルスは、8本のマイナス鎖RNAゲノムを遺伝子として持つ。ゲノムRNAの転写・複製は核内で行なわれ、感染後期に細胞質へ移行しウイルス粒子に取り込まれる。そこで本ウイルス粒子形成機構の解析を行ない、以下の結果を得た。1.ウイルス粒子形成において重要な機能を担っていると考えられるM1蛋白質の合成は、主に、NS1蛋白質および、おそらくM1蛋白質の自己制御により翻訳段階で促進されると考えられる。2.ウイルスゲノムを含むRNP複合体は、核内で、M1蛋白質と複合体を形成することにより、ウイルス粒子形成の場である細胞質へと移送される。3.ウイルス膜蛋白質の1つNAの細胞質ドメインは、ウイルス粒子形成において必須の役割を担っている。4.NS1蛋白質によるM1蛋白質発現促進に必要な、翻訳開始部位上流のRNAシグナルを同定した。今後は、もう1つのウイルス膜蛋白質であるHAの細胞質ドメイン含めた膜蛋白の細胞質ドメインとRNP-M1複合体の相互作用について解析を行なう予定である。一方、RNPトランスフェクション技術を用いた、インフルエンザウイルスワクチンベクター開発の試みも行なった。モデル実験として、麻疹ウイルス表面抗原エピトープの発現を行なうことにした。その為に、まず、麻疹ウイルス中和エピトープを、モノクローナル抗体を用いて得たエスケープ変異株の解析から同定した。このエピトープをcDNA上で、インフルエンザ蛋白に導入し、現在、この様なキメラウイルスの回収を試みている。