RNPトランスフェクション技術を用いたネガティヴストランドRNAウイルスの研究

利用RNP转染技术研究负链RNA病毒

• 批准号: 04271203
• 负责人: 榎並 正芳
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04271203/
• 关键词: インフルエンザウイルス; RNPトランスフェクション; ウイルス粒子形成; ワクチンベクター; 翻訳制御

インフルエンザウイルスは、8本のマイナス鎖RNAゲノムを遺伝子として持つ。ゲノムRNAの転写・複製は核内で行なわれ、感染後期に細胞質へ移行しウイルス粒子に取り込まれる。そこで本ウイルス粒子形成機構の解析を行ない、以下の結果を得た。1.ウイルス粒子形成において重要な機能を担っていると考えられるM1蛋白質の合成は、主に、NS1蛋白質および、おそらくM1蛋白質の自己制御により翻訳段階で促進されると考えられる。2.ウイルスゲノムを含むRNP複合体は、核内で、M1蛋白質と複合体を形成することにより、ウイルス粒子形成の場である細胞質へと移送される。3.ウイルス膜蛋白質の1つNAの細胞質ドメインは、ウイルス粒子形成において必須の役割を担っている。4.NS1蛋白質によるM1蛋白質発現促進に必要な、翻訳開始部位上流のRNAシグナルを同定した。今後は、もう1つのウイルス膜蛋白質であるHAの細胞質ドメイン含めた膜蛋白の細胞質ドメインとRNP-M1複合体の相互作用について解析を行なう予定である。一方、RNPトランスフェクション技術を用いた、インフルエンザウイルスワクチンベクター開発の試みも行なった。モデル実験として、麻疹ウイルス表面抗原エピトープの発現を行なうことにした。その為に、まず、麻疹ウイルス中和エピトープを、モノクローナル抗体を用いて得たエスケープ変異株の解析から同定した。このエピトープをcDNA上で、インフルエンザ蛋白に導入し、現在、この様なキメラウイルスの回収を試みている。

8. The RNA of the virus is transmitted to the host cell. RNA replication and cytoplasmic migration in late infection The analysis of particle formation mechanism was carried out, and the following results were obtained. 1. M1 protein synthesis, host protein, NS1 protein synthesis, M1 protein self-regulation, M2 protein self-regulation, M1 protein self 2. It contains RNP complex, nuclear, M1 protein complex formation, cytoplasmic transfer, particle formation field, etc. 3. The cytoplasmic DNA of the 1 NA of IS membrane proteins and the necessary services for the formation of IS particles are also important. 4. NS1 protein expression and M1 protein expression are necessary for the promotion of RNA synthesis in the upstream of the initiation site. In the future, the analysis of the interaction between HA and RNP-M1 complex will be determined. A party, RNP, RNP It's not like we're going to be able to do this. The analysis of different strains was determined by the method of anti-virus analysis. This is the first time that we've had a chance to introduce a protein into our genome.

项目成果

榎並 正芳: "パラミクソウイルス、ラブドウイルスの遺伝子操作" 蛋白質、核酸、酵素. 37. 2718-2722 (1992)

Masayoshi Enami：“副粘病毒和弹状病毒的基因操作”蛋白质、核酸、酶。37。2718-2722 (1992)

榎並 正芳: "ネガティヴ鎖RNAウイルスの遺伝子操作" ウイルス. 42. 59-65 (1992)

Masayoshi Enami：“负链 RNA 病毒的基因操作”病毒。 42. 59-65 (1992)

K.Enami: "An infuluenza virus temperature-sensitive mutant defective in the nuclear-cytoplasmic transport of the the negative-sense viral RNAs." Virology. (1993)

K.Enami：“一种流感病毒温度敏感突变体，其负义病毒 RNA 的核胞质运输存在缺陷。”