权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

血小板由来血管内皮細胞増殖因子の生理的意義の解析

血小板源性血管内皮细胞生长因子的生理意义分析

基本信息

批准号：
05256217
负责人：
豊島秀男
金额：
$ 1.47万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

血小板中に血管内皮細胞の増殖促進活性があることは古くから知られていたが、その活性が純化精製され血小板由来内皮細胞増殖因子(Platelet-derived Endothelial Cell Growth Factor,PD-ECGF)と命名された。PD-ECGFは分子量45000の一本鎖ポリペプチドで、in vivoで血管新生を促進しin vitroでは内皮細胞のチミジンの取込みとchemotaxisを促進する。cDNAクローニングの結果PD-ECGF transcriptは482アミノ酸をコードしそのアミノ酸配列は分泌に必要なシグナル配列を持たないことが明らかにされている。また、PD-ECGFは所謂増殖因子ではなくthymidine phosphorylaseという酵素であることが明らかにされている。幾つかの培養細胞がPD-ECGFを産生することが明かにされているが、その1つである扁平上皮癌細胞株A431を^<32>P正燐酸でラベルしその可溶化分画を抗PD-ECGF抗体を用いた免疫沈降法で分析したところ、PD-ECGFも燐酸化されていることがあきらかにされた。燐酸化アミノ酸分析の結果、セリン残基が燐酸化されていた。TPA、EGF、forskolinなどの刺激でPD-ECGFの燐酸化には変化がみられなかった。一方、SDS、Mg^<2+>、DTT存在下でPD-ECGFはin vitroで燐酸化された。PD-ECGFのアミノ酸配列にヌクレオチド結合モチーフがあるので、[2,5'-^3H]、[2,5',8-^3H]、[α-^<32>P]、[γ-^<32>P]ATPとPD-ECGFをインキュベートしたところPD-ECGFはいずれの放射性ATP同位体でもラベルされ、PD-ECGFにはATPが結合していると考えられた。[α-^<32>P]、[γ-^<32>P]ATPでラベルしたPD-ECGFの燐酸化アミノ酸分析の結果[γ-^<32>P]ATPでラベルしたPD-ECGFにのみ^<32>P燐酸化セリンのスポットが得られ、PD-ECGFのセリン残基はATPのγ位の燐酸とエステル結合していると考えられた。更に、in vivoで^<32>P正燐酸でラベルしたPD-ECGFのヌクレオチド分析の結果、in vivoでもPD-ECGFはヌクレオチドと結合していることが明らかにされた。

In platelets, vascular endothelial cell proliferation-promoting activity, platelet endothelial cell growth factor (Platelet-derived Endothelial Cell Growth Factor,PD-ECGF) PD-ECGF (molecular weight 45000) and in vivo (angiogenesis) promote in vitro (endothelial cell) and endothelial cells (ECs). Chemotaxis promotes angiogenesis. The results of cDNA test were compared with those of PD-ECGF transcript. The results showed that it was necessary for the secretion of acid to be secreted by acid. The reproductive factors identified by PD-ECGF and PD-ECGF are known to be different from each other in terms of enzymes, enzymes, enzymes and so on. The cell line A431 ^ & lt;32>P was isolated from flat epithelial cancer cell line A431 ^ & lt;32>P. Anti-PD-ECGF antibody was analyzed by immunoprecipitation method and PD-ECGF was acidified by immunoprecipitation. The results of acid analysis and the results of acid analysis, the results of acid analysis, the results of acid analysis and the results of acid analysis. TPA, EGF, forskolin stimulation, PD-ECGF, acidification, acid, acid and so on. One party, SDS, mg ^ & lt;2+>, DTT in the presence of "PD-ECGF" in vitro "acidizing". The combination of PD-ECGF and lt;32&gt, [2L5-^ 3H], [2L5-^ 3H], [α-^ & lt;32>P], [γ-^ & POS]. P] adenosine triphosphate (PD-ECGF), PD-ECGF isotope (ATP), PD-ECGF isotope (ATP), radioactivity (ATP), radioactivity, radioactivity and radioactivity. [α-^ & lt;32>P], [γ-^ & lt;32>P] ATP samples, acidified PD-ECGF, acidified acid analysis results [γ-^ & lt;32>P] ATP cycles PD-ECGF acid analysis ^ & lt;32&gt P-Acidizing acid, PD-ECGF, ATP, γ, acid, amino acid, acid, amino acid, γ position, γ position, and so on. Change, in vivo ^ & lt;32>P is analyzing the results of the analysis of PD-ECGF data, and the results of in vivo analysis of PD-ECGF data in combination with each other.