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プラナリア再生におけるマスター遺伝子としてのホメオボックス遺伝子の研究

同源盒基因作为涡虫再生主基因的研究

基本信息

批准号：
05277217
负责人：
渡辺憲二
金额：
$ 1.66万
依托单位：
Himeji Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05277217/
关键词：
プラナリアホメオボックス遺伝子領域特異的発現

项目摘要

プラナリアは再生能力の強さと、三胚葉性の原型をもつ点で動物体制の研究に独特の機会を与えている。プラナリアの再生における形態形成を明らかにするために、軸形成に強い相関をもつHOM-Cタイプのホメオボックス遺伝子、位置情報に関連した細胞間シグナル分子の解析を進めた。ゲノムを用いたPCR法によって、19種類のホメオボックス遺伝子群を同定した。PCR産物をプロープにして、プラナリア頭部のcDNA IibraryからDjh3,Djh4の2個のクローンをえ、全長の構造を決定した。Djh3,Djh4は各々ショウジョウバエのabd-AとDfdの相同遺伝子であり、HOM-Cタイプのホメオボックス遺伝子がプラナリアにおいて初めて確認された。Djh3とDjh4はcDNAライブラリーサイズ250万の中で各1個しか存在しないものであり、in situ hybridizationで検出できないレベルあると考えられる。HOM-Cが正常プラナリアに低レベルでしか発現せず、再生体で発現レベルが高まる可能性を検討した。1,2日目再生体mRNAからPCRによりホメオボックス遺伝子を検索したところ、新たに6個のHOM-Cタイプのものをえた。扁形動物であるプラナリアに約8種のHOM-Cタイプの遺伝子が確認された。位置情報に関連した頭部領域特異的な遺伝子、抗体を効率的に探索するために、IDS法(immuno-differential screening)を開発した。頭部と咽頭に対する2種類のポリクローン抗体でcDNA発現ライブラリーを検索し、比較することによって、頭に特異的なcDNAクローンと特異抗体を同時にえることができた。特に、注目されたのは、ウエスタンブロットで頭、尾の末端構造に強く発現する30kDタンパク質とその遺伝子(PN5)である。PN5はノザンブロットでは検出できない発現量の少ない遺伝子であり、遺伝子構造からはロイシンジッパーをもつ分泌性の新規なタンパク質をコードしていた。

The study of animal system has unique opportunities for regeneration and triple-leaf prototypy. The morphological formation of the cell regeneration is clearly related to the molecular analysis of the cell regeneration. The PCR method was used to identify 19 species of DNA. PCR products were cloned into cDNA library of Djh3, Djh4, and the structure of the cDNA library was determined. Djh3,Djh4,Djh4, Djh 5, Djh 6, Djh 7, Djh 8, Djh 9, Djh 10, Djh 11, Djh 12, Djh 11, Djh 12, Djh 13, Djh 14, Djh 10, Djh 10, Djh 11, Djh 10, Djh 11, Djh 10, Djh 10, Djh 11, Djh 11, Djh 10, Djh 11, D Djh3 and Djh4 are cDNA fragments of 2.5 million DNA fragments, one each in situ hybridization. HOM-C is a low probability of normal occurrence and a high probability of regeneration. 1, 2, 6, 7, 8, 9, 10, 1 About 8 species of homo-C species of flat-shaped animals have been identified. Location information is associated with head domain specific detection, antibody efficiency detection, and immuno-differential screening. The cDNA expression of two kinds of antibodies in the head is similar to that in the head. The cDNA expression of two kinds of antibodies in the head is similar to that in the head. In particular, note that the structure of the head and tail ends of the head and tail is strongly reflected in the 30kD mass and the core (PN5). PN5 is a new type of protein that can be secreted from a protein.