デフィニティブな造血発生における、PEBP2・c-Myb転写因子の相互作用の解析

PEBP2 和 c-Myb 转录因子在最终造血发育中的相互作用分析

• 批准号: 09253203
• 负责人: 仁木 賢
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09253203/
• 关键词: 転写因子; AML1; PEBP2β; CBFβ; AGM; 造血; 遺伝子ターゲティング

哺乳類の造血能の発生はマウスの場合、先ず胎齢7.5日に卵黄嚢にてプリミティブな造血細胞が出現し、これは一過性に終息する。次いで11.5日齢に肝に、デフィニテイブな造血細胞が出現して、これが一生にわたる造血を担う。近年、デフィニティブな造血前駆細胞は卵黄嚢よりは遅く、しかし肝よりは早く、AGM(aorta,gonad and mesonephros)領域に発生することがE.Dzierzakらにより示された。一方東大・分生研の宮嶋らは、11.5日齢のマウス胎仔のAGM領域を細胞培養することにより、血球細胞をin vitroで発生・増殖できる系を開発した。本研究ではこの系を用いることにより、培養細胞中のAML1及びPEBP2β/CBFβ蛋白の発現、更にこれら遺伝子の欠損による血球細胞産生への影響につき解析した。AML1、PEBP2β/CBFβ遺伝子は、ヘテロ2量体として機能するPEBP2/CBF転写因子の各サブユニットをコードする。また両遺伝子ともに、マウス胎仔肝におけるデフィニティブな造血能の発生に必須の機能を担うことが知られている。先ず遺伝子変異のないAGM培養下に出現する(血球を含む)大部分の細胞で、AML1、PEBP2β/CBFβ蛋白の陽性染色像が観察された。一方AML1(-/-)やPEBP2β/CBFβ(-/-)のAGM培養系においては、血球細胞は全く出現しなかった。また各遺伝子につき(+/-)であるAGM培養系では、得られるCFU-C活性が野生型に比べ著明に減少していた。以上の観察から次の2点が結論された。即ち、1)近年我々を含めて報告したAML1(-/-)またはPEBP2β/CBFβ(-/-)胎仔肝におけるデフィニティブな造血の欠如は、本来なら肝に先行してAGM領域に局在するはずの、造血前駆細胞の傷害によるものである。2)AGMにおける造血前駆細胞の発生・増殖は、PEBP2/CBF転写因子の両サブユニットの量に依存する。なおc-Myb転写因子の機能については、c-myb(-/-)のAGM培養を現在行っており、検討中である。

Mammalian hematopoiesis can be developed in different situations, such as egg yolk, egg On the 11.5th day, hematopoietic cells appeared in the liver, and hematopoietic cells appeared in the whole life. In recent years, the development of E.Dzierzak in the field of AGM(aorta,gonad and mesophros) has been demonstrated. The development of cell culture and development of blood cells in vitro was carried out on 11.5 days after the birth of the fetus. In this study, we analyzed the expression of AML1 and PEBP2 β/CBFβ proteins in cultured cells, and the effects of gene damage on hemocyte production. AML1, PEBP2 β/CBFβ gene, PEBP2 vector, function, PEBP2/CBF gene, function, function The function of the fetus is essential for the development of hematopoiesis. The positive staining of AML1 and PEBP2 β/CBFβ proteins was observed in most of the cells in AGM culture. AML1 (-/-), PEBP2 β/CBFβ(-/-) and AGM culture lines were found to be completely free of hemocytes. The CFU-C activity of AGM culture lines was decreased compared with wild type. The above two points are concluded. That is, in recent years, we have reported that AML1 (-/-) and PEBP2 β/CBFβ(-/-) fetal liver damage is caused by the absence of hematopoietic cells in the AGM domain. 2)AGM is dependent on the production and growth of hematopoietic progenitor cells and the amount of PEBP2/CBF gene. c-myb(-/-) and AGM culture.

项目成果

Niki, M.: "Hematopoiesis in the fetal liver is impaired by targeted mutagenesis of a gene encoding a non-DNA binding subunit of the transcription factor, PEBP2/CBF." Proc.Natl.Acad.Sci.USA.94. 5697-5702 (1997)

Niki, M.：“编码转录因子 PEBP2/CBF 的非 DNA 结合亚基的基因的定向诱变会损害胎儿肝脏的造血功能。”

Tanaka, Y.: "The protooncogene product, PEBP2β/CBFβ, is mainly located in the cytoplasm and has an affinity with cytoskeletal structures." Oncogene. 15. 677-683 (1997)

Tanaka, Y.：“原癌基因产物 PEBP2β/CBFβ 主要位于细胞质中，与细胞骨架结构具有亲和力。” 15. 677-683 (1997)。

Chiba, N.: "Differentiation dependent expression and distinct subcellular localization of the protooncogene product, PEBP2β/CBFβ, in muscle development." Oncogene. 14. 2543-2552 (1997)

Chiba, N.：“原癌基因产物 PEBP2β/CBFβ 在肌肉发育中的分化依赖性表达和不同的亚细胞定位。”14. 2543-2552 (1997)