新しいポリオーマウイルス・エンハンサー結合因子の遺伝子単離及びその構造・機能解析

新型多瘤病毒增强子结合因子的基因分离和结构/功能分析

• 批准号: 06770219
• 负责人: 仁木 賢
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770219/
• 关键词: PEBP2; ジーンターゲティング; Dominant negative; トランスジェニックマウス

PEBP2(ポリオーマウイルスエンハンサー結合因子2)は、DNA結合能を有するαと、αのDNA結合能を増強するβの二つのサブユニットからなるが、αは少なくともαA,αB,αCの三つの遺伝子があることが知られている。PEBP2αは、Tリンパ球で強く発現しおり、かつT細胞抗原受容体(TCR)遺伝子等のTリンパ球特異的な発現に関与していることが知られている。又、ヒト急性骨髄性白血病(AML)でt(8;21)(q22;q22)の相互転座、及びinvl6(p13;q22)の逆位のみられる型で、転座点に位置する遺伝子が単離、報告されたが、それらは、各々マウスのPEBP2αB、PEBP2αβ遺伝子に対応することが明らかになった。すなわち、転写因子をコードするPEBP2α,β遺伝子ともにAML発症のプロトオンコジーン候補であることが明らかになり、PEBP2遺伝子は、Tリンパ球、骨髄球系の増殖、分化過程において機能していることが強く示唆された。1.これらを解析するためにターゲティングマウスの作出を試みた。β遺伝子の第一エクソンを欠失するようにターゲティングベクターを作製しES細胞(J1)にエレクトロポレーションにて導入し、G418セレクションにて生き残ったES細胞のうち100クローンについてDNAを抽出しサザン解析を行ったが、相同組換え体は得られなかった。そこで、このDNAを鋳型としてPCRの条件設定を行った。次回は、この条件を用いたPCRにて相同組換え体の同定を行い、相同組換え体を得たいと考えている。2.さらに、αA、αB、αCは、runt Domainと呼ばれるDNA結合領域を共通に持っているが、runt Domainのみは、転写因子αA、αB、αCに対してDominant negativeに働くことが予想される。そこでrunt Domainのトランスジェニックマウスの作出を試み、現在、マウスが誕生しつつあるところである。

PEBP2 (ポ リ オ ー マ ウ イ ル ス エ ン ハ ン サ ー combination factor 2) は, DNA binding energy を have す る alpha と, alpha の DNA binding energy を raised strong す る beta の two つ の サ ブ ユ ニ ッ ト か ら な る が, less alpha は な く と も alpha A, alpha B, alpha C の three つ の heritage 伝 son が あ る こ と が know ら れ て い る. PEBP2 alpha は, T リ ン パ ball で strong く 発 now し お り, か つ T cell antigen by let body (TCR) heritage 伝 child etc. の T リ ン パ ball specific な 発 now に masato and し て い る こ と が know ら れ て い る. Also, ヒト acute myeloid leukemia (AML)でt(8;21)(q22;q22) <s:1> are mutually 転 seats, and びinvl6(p13; Q22) の inverse の み ら れ る type で, planning point に す る posthumous son 伝 が 単 from, report さ れ た が, そ れ ら は, various 々 マ ウ ス の PEBP2 alpha B, PEBP2 alpha beta but 伝 に 応 seaborne す る こ と が Ming ら か に な っ た. す な わ ち, planning to write factor を コ ー ド す る PEBP2 alpha, beta heritage 伝 son と も に AML 発 disease の プ ロ ト オ ン コ ジ ー ン alternate で あ る こ と が Ming ら か に な り, PEBP2 heritage 伝 は, T リ ン パ ball, bone marrow, differentiation is の raised colonization process に お い て function し て い る こ と が く and shown strong sucking さ れ た. 1. Youdaoplaceholder6 れらを analysis するためにタ れらを ゲティ グ グ ウス ウス みた make a を try みた. Beta posthumous son 伝 の first エ ク ソ ン を owe lost す る よ う に タ ー ゲ テ ィ ン グ ベ ク タ ー を cropping し ES cells (J1) に エ レ ク ト ロ ポ レ ー シ ョ ン に て import し, G418 セ レ ク シ ョ ン に て raw き residual っ た ES cells の う ち 100 ク ロ ー ン に つ い て DNA を spare し サ ザ ン parsing line を っ た が, the same group in え は Get られな った. Youdaoplaceholder0 で で, <s:1> DNAを casting と て てPCR <s:1> condition setting を row った. Time は, こ を の conditions with い た PCR に て in same group の え body line with fixed を い, the same group in え body を た い と exam え て い る. 2. さ ら に, alpha and alpha B, alpha C は, runt Domain と shout ば れ る dna-binding Domain を に hold common っ て い る が, runt Domain の み は, planning to write factor alpha and alpha B, alpha C に し seaborne て Dominant negative に 働 く こ と が to think さ れ る. そ こ で runt Domain の ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク マ ウ ス の を み, now, マ ウ ス が born し つ つ あ る と こ ろ で あ る.

项目成果

Masanobu Satake: "Expression of the Runt Domain-Encoding PEBP2α Genes in T cells during Thymic Development" Molecular and Cellular Biology. 15. 1662-1670 (1995)

Masanobu Satake：“胸腺发育过程中 T 细胞中 Runt 结构域编码 PEBP2α 基因的表达”《分子与细胞生物学》15。1662-1670 (1995)。