ヒトMSH3蛋白質の機能解析

人MSH3蛋白的功能分析

• 批准号: 09269224
• 负责人: 池島 三与子
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Nippon Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09269224/
• 关键词: ミスマッチ修復; 発癌; DNA修復蛋白質; ゲノム不安定性

私達は昨年バキュロウイルス系で発現したhMSH3を含むヘテロ二量体(hMSH2/hMSH3)がループを持つミスマッチに選択的に結合することを示した(Curr.Biol.,6:1181-1184,1996)。塩基置換ミスマッチに結合するヘテロ二量体(hMSH2/hMSH6)がhMutSαとすでに名付けられていることから、この二量体をhMutSβと命名した。3種のMutSホモログ(hMSH2,hMSH6,hMSH3)から成る2種のヘテロ二量体(hMutSα,hMutSβ)によるミスマッチ結合モデルは真核生物における共通の分子機構と考えられている。本年は2種のヘテロ二量体(hMutSα,hMutSβ)がヒト細胞抽出液に存在することをゲルシフト法で確かめた。さらに3種のMutSホモログの細胞における発現量をNorthern blotにより比べると、hMSH2:hMSH6:hMSH3=1:0.6:0.2であった。hMSH3遺伝子が約100倍に増幅しているメソトレキセート(MTX)耐性細胞ではhMSH2:hMSH6:hMSH3=1:0.6:15.6であり、ヘテロ二量体の形成がhMutSβに片寄っていることが予想された。実際MTX耐性細胞ではゲルシフト法を行うとhMutSαの複合体の形成が抑えられており、塩基置換ミスマッチであるG/Gミスマッチの修復活性が低下していることが観察された。次にhMSH3の発癌への関与を変異解析により検討した。79例の孤発性大腸癌患者のゲノム不安定性を5箇所のマイクロサテライトを用いて検討すると5例が不安定性を示し、それらはTGF-βRIIのAリピートの欠失変異あるいは塩基置換変異を伴っていた。そのうちの1例においてはhMSH3の(A)8部位でのAの挿入と欠失が認められた。これらのことより、ゲノム不安定性を呈する弧発性大腸癌の一部は、ゲノム不安定性の結果TGF-βRIIの不活化に至ったと考えられ、不安定性の増強にhMSH3遺伝子の変異が寄与したと推測された。

hMSH3 contains two molecules (hMSH2/hMSH3), which are selected from the group consisting of two molecules (Curr.Biol., 6:1181-1184,1996)。The two quantities (hMSH2/hMSH6) are named hMutSα and hMutSβ. Three kinds of MutS molecules (hMSH2,hMSH6,hMSH3) have been synthesized and two kinds of MutS molecules (hMutSα,hMutSβ) have been synthesized. This year, there are two kinds of diploid (hMutSα,hMutSβ) in the cell extract. Northern blot analysis showed that hMSH2: hMSH6: hMSH3 =1:0.6:0.2. hMSH3 gene was amplified by about 100 fold in MTX tolerant cells. hMSH2: hMSH6: hMSH3 =1:0.6:15.6. hMSH3 gene was amplified by about 100 fold in MTX tolerant cells. The MTX-tolerant cells were observed to have low repair activity due to the presence of hMutSα complex. Next, hMSH3 is related to the development of cancer and different analysis. 5 Cases of Instability in 79 Cases of Isolated Colorectal Cancer 1 case of hMSH3 (A)8 position of A The results of TGF-βRII inactivation and the increase of hMSH3 gene expression are speculated.

项目成果

池島 三与子 他: "癌抑制蛋白質と制癌剤;ミスマッチ修復蛋白質" 癌と化学療法. 24. 1392-1399 (1997)

Miyoko Ikeshima 等人：“肿瘤抑制蛋白和抗癌药物；错配修复蛋白”《癌症与化疗》24. 1392-1399 (1997)。

Orimo,H.et al.: "A novel missense mutation and frameshift mutations in the type II receptor of transforming growth factor-β gene in sporadie colon cancer with microsatellite instability." Mutation Research Genomics. in press. (1998)

Orimo, H. 等人：“散发性结肠癌中具有微卫星不稳定性的转化生长因子-β 基因 II 型受体的新型错义突变和移码突变”（突变研究基因组学）。

池島 三与子 他: "「DNA複製・修復と発癌」(松影昭夫編)のうち第II章の3「ミスマッチ修復の分子機構と発癌」" 羊土社, 15 (1996)

Miyoko Ikejima 等：“DNA 复制/修复和癌变”中的第 II 章第 3 章“错配修复和癌变的分子机制”（松影明夫编辑）Yodosha，15 (1996)

Palombo,F.et al.: "hMutSβ,a heterodimer of hMSH2 and hMSH3,binds to insertion/deletion loops in DNA." Current Biology. 6. 1181-1184 (1996)

Palombo, F. 等人：“hMutSβ，hMSH2 和 hMSH3 的异二聚体，与 DNA 中的插入/删除环结合。”《当代生物学》6. 1181-1184 (1996)

Inokuchi,K.et al.: "Loss of expression of the human MSH3 gene in hematological malignancies." Biochem.Biophys.Res.Commun.214. 171-179 (1995)

Inokuchi,K.et al.：“血液恶性肿瘤中人类 MSH3 基因的表达缺失。”