デュアルスペシフィックホスファターゼの阻害剤開発と機能探索

双特异性磷酸酶抑制剂的开发及功能探索

• 批准号: 09273253
• 负责人: 長田 裕之
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09273253/
• 关键词: ホスファターゼ; RK-682; VHR; 構造活性相関; 拮抗阻害

放線菌Streptomyces属の一菌株より単離したRK-682(3-hexadecanoyl-5-hydroxymethyltetronic acid)は,デュアルスペシフィティーホスファターゼであるVHRに対して強力な阻害を示す。本物質を化学的に改変して,より特異性が高く阻害活性の強いものを開発すること,およびVHR阻害機構を解明することを目的として実験を行った。実験法:RK-682のテトロン酸部分を残して側鎖を化学修飾した類縁体を多数合成した。RK-682の脱リン酸化酵素活性は,合成基質であるパラニトロフェニルリン酸を用いて,リン酸基が外れたニトロフェニル基の呼吸波長の変化を測定した。結果と考察:多数のRK-682類縁体を用いることにより,次のような構造相関活性が示唆された。1)テトロン酸部分から伸びるアルキル側鎖は阻害活性に必須であり,アルキル基の長さによって阻害活性が変化する。2)4位の水酸基は,メチル化すると阻害活性が消失することから重要である。3)5位の水酸基は,メチル化誘導体も立体異性体も阻害活性に変化が無いことから,阻害活性発現には重要でないことが明らかになった。次に,これらの構造活性相関の結果をもとにして,RK-682のVHR酵素の阻害機構について考察した。RK-682はVHRの脱リン酸化活性をIC_<50>=12.5μMの濃度で阻害した。同一条件下でarsenateも同様の濃度で阻害活性を示し,両者とも基質のパラニトロフェニルリン酸と拮抗阻害した。しかしその阻害パターンはarsenateがVHR一分子に一分子結合して阻害する場合(Ki=18μM)と異なり,RK-682はVHR酵素一分子につき二分子結合すると考えた場合(Ki=21μM)に良い相関係数が得られた。

RK-682(3-hexadecanoyl-5-hydroxymethyltetronic acid), a strain of Streptomyces, showed strong resistance to the disease. The substance is chemically modified, and the specificity of the substance increases the activity of the inhibitor. The activity of the inhibitor increases the activity of the inhibitor. Method:RK-682 was chemically modified to form the majority of its derivatives. RK-682 deacidifying enzyme activity, synthesis of substrate, use of deacidifying acid, change of respiratory wavelength of deacidifying acid group Results: Most of the RK-682-like molecules were used in the study, and the secondary structure-related activities were observed. 1) The acid part of the molecule must be removed from the molecule to prevent its harmful activity. 2)4 The water base of the site is not important. 3)5 A stereochemical inducer is an important inhibitor of activity. In addition, the results related to structural activity of RK-682 were investigated. RK-682 inhibited VHR deacidification activity at a concentration of IC_<50>=12.5μM. Under the same conditions, the inhibitory activity of arsenate was shown at the same concentration, and the inhibitory activity of arsenate was shown at the same concentration. The correlation coefficient between RK-682 and VHR enzyme was obtained when Ki=18μM and Ki=21μM.

项目成果

Yao R.: "Specific activation of a c-Jun NH2 terminal kinase isoform and induction of neurite outgrowth in PC-12 cells by staurosporine" J.Biol..Chcm.272. 18261-18267 (1997)

Yao R.：“十字孢菌素对 c-Jun NH2 末端激酶亚型的特异性激活和 PC-12 细胞中神经突生长的诱导”J.Biol..Chcm.272。

Yao R.: "Induction of neurite outgrowth in PC12 cells by g-lactam-related compounds via Ras-MAP kinase signaling pathway independent mechanism" Exp.Cell Res.234. 233-239 (1997)

Yao R.：“g-内酰胺相关化合物通过 Ras-MAP 激酶信号通路独立机制诱导 PC12 细胞中的神经突生长”Exp.Cell Res.234。

Osada H.: "Screening of cell cycle inhibitors from microbial matabolites by a bioassay using a mouse cdc2 mutant cell line,tsFT210" Bioorg.Med.Chem.5. 193-203 (1997)

Osada H.：“使用小鼠 cdc2 突变细胞系 tsFT210 通过生物测定从微生物代谢物中筛选细胞周期抑制剂”Bioorg.Med.Chem.5。

Kakeya H.: "Cytotrienins A,a novel apoptosis inducer in human leukemia HL-60 cells" J.Antibiot.50. 370-372 (1997)

Kakeya H.：“Cytotrienins A，人类白血病 HL-60 细胞中的一种新型凋亡诱导剂”J.Antibiot.50。

Takahashi H.: "Inhibitory action of Revermycin on TGF-a-dependent growth of ovarian carcinoma,BG-1 in vitro and in vivo" Oncol.Res.9. 7-11 (1997)

Takahashi H.：“Revermycin 对 TGF-α 依赖性卵巢癌、BG-1 体外和体内生长的抑制作用”Oncol.Res.9。