デュアルスペシフィックホスファターゼの阻害剤開発と機能探索

双特异性磷酸酶抑制剂的开发及功能探索

• 批准号: 10169265
• 负责人: 長田 裕之
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10169265/
• 关键词: ホスファターゼ; 構造活性相関; VHR; ホスラクトマイシン; RK-1009; ホスファトキノン

1.ホスファターゼの解析:ヒト細胞由来のデュアルスペシフイシティーホスファターゼVHRの構造生物学的解析を目的として,VHR蛋白質を調製した。VHR遺伝子を組み込んだ大腸菌BL21から,VHR蛋白質を約20mg調製した。VHR単独での結晶化は成功し,現在はVHRと阻害剤RK-682との共結晶を作成中である。2:新しいホスファターゼ阻害剤の開発:2-1.放線菌由来のホスラクトマイシン類が,セリンスレオニンホスファターゼ(PP2A)の強力かつ選択的な阻害剤であることを明らかにした。2-2.放線菌培養液から,新しいホスファターゼ阻害剤RK-1009(factumycin関連化合物)を単離した。これまで,原核生物ではスレオニン残基のリン酸化酵素・脱リン酸化酵素に関する報告はほとんどなかったが,今回,.RK.1009で処理した放線菌において著しいリン酸化スレオニンの蓄積が認められた。2-3.放線菌培養液からチロシンホスファターゼ阻害剤ホスファトキノンAとBを見出した。ホスファトキノンAとBはチロシンホスファターゼCD45を特異的に阻害し、その50%阻害濃度はそれぞれ約10,μg/mlであった。また、その阻害様式は基質に対して拮抗型であった。VHR,PTPs2,PPl,PP2A,cdc25a,cdc25bに対してホスファトキノンは,50μg/mlでも阻害活性は示さないことから,CD45に対して高い特異性を示す阻害であることが示された。,

1. Analysis of ホスファターゼの: Origin of ヒデュアルスペシフイシティーホスAnalysis of structural biology of VHR and the purpose of VHR protein modulation. VHR is made of Escherichia coli BL21, and VHR protein is prepared with about 20 mg. VHR has been successfully crystallized on its own, and now the VHR blocker RK-682 and co-crystallized are in the process of being produced. 2: New sterilization agent: 2-1. Origin of actinomycetesンスレオニンホスファターゼ(PP2A)の强かつ选択的な hindered であることを明らかにした. 2-2. Actinomycete culture solution, new inhibitor RK-1009 (factumycin-related compound), new inhibitor.これまで, prokaryotic ではスレオニン residue のリン acidifying enzyme and de-リン acidifying enzyme に关する report はほとんどなかったが, this time, .RK.1009 is treated with したactinomycetes and is acidified and accumulated. 2-3. Actinomycete culture solution, からチロシンホスファターゼ hindering ホスファトキノンAとBを见出した.ホスファトキノンAとBはチロシンホスファターゼCD45をSpecialにThe inhibitory concentration of 50% inhibitory substance is about 10, μg/ml.また, その hinder 様 type は matrix に対 し て antagonistic で あ っ た. VHR,PTPs2,PPl,PP2A,cdc25a,cdc25bに対してホスファトキノンは,50μ g/ml has high blocking activity and high specificity, and has high blocking activity and high specificity. ,

项目成果

H.P.Zhang: "Biosynthesis of 1-aminocyclopropanc-1-carboxylic acid moicty on cytotricnin A in Streptomyces sp." Tetrahedron Lett.39. 6947-6948 (1998)

H.P.Zhang：“链霉菌中细胞三素 A 上 1-氨基环丙烷-1-羧酸部分的生物合成”。

長田裕之: "アポトーシス誘導性バイオプロープの探索と作用機構" バイオインダストリー. 15. 14-21 (1998)

Hiroyuki Nagata：“寻找细胞凋亡诱导生物探针及其作用机制”生物工业。15. 14-21 (1998)

H.Kakeya: "Isolation and biological activity of a novel cytokine modulator, cytoxazone" J.Antibiot.51. 1126-1128 (1998)

H.Kakeya：“新型细胞因子调节剂 cytoxazone 的分离和生物活性”J.Antibiot.51。

H.Osada: "Discovery and mechanism of action of nonpeptide neuritogenic compound" Drugs of the Future. 23. 395-399 (1998)

H.Osada：“非肽致神经突化合物的发现及其作用机制”未来药物。

S.Kagami: "New types of liposidomycins which inhibit bacterial peptidoglycan synthesis produced by Streptomyces" Actinomycetol.12. 110-119 (1998)

S.Kagami：“新型脂质霉素，可抑制链霉菌产生的细菌肽聚糖合成”Actinomycetol.12。