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脊椎動物形態形成遺伝子ホモログの棘皮動物における発現と機能の解析

脊椎动物形态发生基因同源物在棘皮动物中的表达和功能分析

基本信息

批准号：
09275219
负责人：
嶋田拓
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09275219/
关键词：
バフンウニ形態形成転写因子 HpOtx HpEts HpHox8 HpLim1

项目摘要

Otxは、ショウジョウバエの頭部形成転位因子Otdのマウスホモログとしてクローン化され、マウスでも脳の形成に働くことが知られている。我々は、ウニ胚の体軸(口側-反口側軸)形成に重要な役割を持つアリールスルファターゼ(Ars)蛋白質の転写調節にウニOtx(HpOtx)が働くことを明らかにした。その結果、脊椎動物の形態形成に働く転写因子が同じ新口動物系列で脊椎動物より下位にある棘皮動物の形作りにどのような役割を担うかに興味を持ち、形態形成に関わる転写因子機能の進化を考えるため本研究を企画した。本年度はバフンウニからEts(HpEts)cDNA、HpHox8 cDNA、およびHpLim1 cDNAをクローン化し、強制発現実験を中心に、ウニ発生におけるこれら脊椎動物形態形成転写因子の役割を調べた。強制発現はmRNAをバフンウニ卵に顕微注入し、卵を受精させて発生させ、正常胚の原腸期に相当する時間後、発生異常を観察した。胚葉の同定は、外胚葉、中胚葉、及び内胚葉に特異的に発現する蛋白質に対する抗体を用いた全載標品の免疫染色によった。(1)HpOtxの強制発現はウニ胚の反口側外胚葉化を生じた。(2)HpEtsは母系mRNAであり、mRNAをプローブとするホールマウントインシツにより胞胚期にはHpEts mRNAは一次間充織細胞になる大小割球系列細胞にのみ検出された。HpEtsを強制発現させたウニ胚は、胞胚が崩れて全細胞が一次間充織細胞となり、仮足をだして運動した。この細胞を馬血清存在下で培養すると骨片を形成した。これらはすべて一次間充織細胞の特徴である。HpEtsを強制発現させた胚では、中胚葉性の一次間充織細胞特異的な抗原のみが検出され、外胚葉と内胚葉の抗原は検出されなかった。(3)HpHox8の強制発現はウニ胚の反口側外胚葉化をもたらした。(4)HpLim1の強制発現により、胚細胞は口側外胚葉化した。この結果、脊椎動物の形態形成転写因子が棘皮動物の形態形成にも関わることがわかった。

Otx is the head formation factor of Otx. The body axis (oral-to-oral axis) of the embryo is important for the formation of protein regulation. The results, vertebrate morphogenesis, writing factors, and the evolution of the function of the writing factors in the vertebrate series, the vertebrate series This year, the cDNA of Ets(HpEts), HpHox8 cDNA, HpLim1 cDNA was transformed into the stress development center, and the stress development center was modulated into the vertebrate morphogenetic factors. Stress expression of mRNA, microinjection of egg, fertilization of egg, development of normal embryo, and detection of abnormal development Antibodies were used to detect proteins specific to embryo, ectoembryo, mesoembryo, and endoembryo. (1) The forced appearance of HpOtx is responsible for the aboral ectoderm formation of the embryo. (2)HpEts maternal mRNA is expressed in primary mesenchymal cells. HpEts were exposed to stress, and the embryo and embryo were destroyed. The cells were cultured in the presence of horse serum to form bone fragments. The characteristics of primary mesenchymal cells. HpEts are produced under stress in embryos, mesoderms and primary mesenchymal cell-specific antigens. (3) The stress of HpHox8 appeared in the embryo and the apostomal ectoblast. (4)HpLim1 stress development, embryo cell retro-oral ectodermal transformation. The result is that vertebrate morphogenesis factors are related to echinoderm morphogenesis.