マウス人工的突然変異tRNA遺伝子導入によるmtDNAノックアウトマウスの作製
通过人工将突变的tRNA基因引入小鼠体内来创建mtDNA敲除小鼠
基本信息
- 批准号:09278203
- 负责人:
- 金额:$ 1.54万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
- 财政年份:1997
- 资助国家:日本
- 起止时间:1997 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
(1)突然変異mtDNA導入マウスの作製には、マウスのmtDNA欠損細胞(ρ^0細胞)の樹立が必要不可欠であるが、最近申請者らは世界で初めてマウスのρ^0細胞の樹立に成功した(Inoue,K.,et al.J.Biol.Chem.1997;Inoue,K.,et al.BBRC 1997,in press)。また、この細胞を用いてmtDNAの突然変異が糖尿病の原因になり得ることを直接立証した(Soejima,A.,et al.J.Biol.Chem.1996)。更に、この細胞に老化したマウスの脳神経系のmtDNAを細胞融合法によって人工的に導入する実験系も確立した(Inoue,K.,et al.J.Biol.Chem.,1997)。(2)ごく最近当初の目的である人工的に突然変異を導入したマウスmtDNA含むシャトルベクターの作製に成功し、このベクターのミトコンドリアへ導入法等の確立に全力をあげているところである。(3)最後に、様々なヒトの病原性突然変異mtDNAを導入したHeLa細胞を使って、ミトコンドリアでこれまで考えられてきた常識を覆えす事実、すなわち"細胞内のミトコンドリアは機能的には単一である"という新しい仮説を提唱し、遺伝学の基礎的分野にも大きく貢献することができた(Takai,D.,et al.,J.Biol.Chem.1997)。今後の展開:mtDNA突然変異の病原性と発病の機構の解明および治療薬のスクリーニングには、ミトコンドリアノックアウトによるミトコンドリア疾患モデルマウスの確立が極めて有効である。しかしながら技術的な障害により、ミトコンドリアノックアウトマウスの作製は世界的レベルで研究されているにもかかわらず未だ成功した報告はない。このような状況の中で、申請者らは本研究助成を得てすでに第一の問題であるマウスのρ^0細胞の樹立に成功し、更にマウスmtDNA含むシャトルベクターの作製に成功したことから第二の問題もクリアしつつあり、本申請の目的である"mtDNAノックアウトマウスの作製"を実現できる見通しがでてきた。
(1)A sudden change in mtDNA production is necessary for the establishment of deficient mtDNA cells (ρ^0 cells). The most recent application is for the establishment of deficient mtDNA cells (Inoue,K., et al.J.Biol.Chem.1997;Inoue,K., et al.BBRC 1997,in press)。The sudden change in mtDNA usage in these cells is a direct evidence of the causes of diabetes (Soejima,A., et al.J.Biol.Chem.1996)。In addition, the cell aging process and the mtDNA fusion method were used to establish the gene system (Inoue,K., et al.J.Biol.Chem., 1997)。(2)Recently, the goal of artificial mutation is to introduce mtDNA into the system successfully, and the introduction method of mtDNA into the system is to establish the full force of mtDNA mutation. (3)Finally, the introduction of pathogenic mutant mtDNA into HeLa cells is a major contribution to the development of novel and fundamental knowledge of genetic engineering (Takai,D., et al., J.Biol.Chem.1997)。Future developments: Pathogenic mechanisms of mtDNA mutation and mechanisms of disease development, mechanisms of treatment, mechanisms of disease development, mechanisms of disease development, mechanisms of disease development, The research on the technical barriers to the development of new technologies has not been successful. The first problem is the successful establishment of mtDNA cells, and the second problem is the successful production of mtDNA. The purpose of this application is to achieve the goal of "mtDNA production."
项目成果
期刊论文数量(12)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Kotoyo Isobe: "Nuclear-recessive mutations of factors involved in mitochondrial translation are responsible for age-related respiration deficiency of human skin fibroblasts" J.Biol.Chem.(in press). (1998)
Kotoyo Isobe:“参与线粒体翻译的因子的核隐性突变是导致人类皮肤成纤维细胞与年龄相关的呼吸缺陷的原因”J.Biol.Chem.(出版中)。
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- 通讯作者:
Kimiko Inoue: "Isolation of mtDNA-less mouse cell lines and their application for trapping mouse synaptosomal mtDNA with deletion mutations." J.Biol.Chem.272. 15510-15515 (1997)
Kimiko Inoue:“无 mtDNA 小鼠细胞系的分离及其在捕获具有缺失突变的小鼠突触体 mtDNA 中的应用。”
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- 影响因子:0
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Daisaku Takai: "The interorganellar interaction between distinct human mitochondria with deletion mutant mtDNA from a patient with mitochondrial disease and with HeLa mtDNA." J.Biol.Chem.272. 6028-6033 (1997)
Daisaku Takai:“不同的人类线粒体与线粒体疾病患者的缺失突变 mtDNA 和 HeLa mtDNA 之间的细胞器间相互作用。”
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- 通讯作者:
Kotoyo Isobe: "Identification of inheritance modes of mitochondrial diseases by introduction of pure nuclei from mtDNA-less HeLa cells to patient-derived fibroblasts." J.Biol.Chem.272. 12606-12610 (1997)
Kotoyo Isobe:“通过将不含 mtDNA 的 HeLa 细胞的纯细胞核引入患者来源的成纤维细胞来鉴定线粒体疾病的遗传模式。”
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Kimiko Inoue: "Isolation and characterization of mitochondrial DNA-less lines from various mammalian cell lines by application of an anticancer drug,ditercalinium" Biochem.Biophys.Res.Commun.239. 257-260 (1997)
Kimiko Inoue:“通过应用抗癌药物 ditercalinium 从各种哺乳动物细胞系中分离和表征无线粒体 DNA 的细胞系”Biochem.Biophys.Res.Commun.239。
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