神経幹細胞特異的遺伝子発現アデノウイルスベクターによる脊髄損傷治療

使用神经干细胞特异性基因表达腺病毒载体治疗脊髓损伤

• 批准号: 14571300
• 负责人: 小林 聡
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14571300/
• 关键词: 神経幹細胞; 脊髄損傷; ネスチン; アデノウイルスベクター

(1)脊髄損傷後の脊髄中心管の上衣細胞(神経幹細胞)の動態を調べるために螢光色素DiIをラット側脳室内に投与し、上衣細胞を標識した後、脊髄損傷モデルを作製した。脊髄損傷モデルは、脊髄後索を中心にmicroscissorsで切断することにより作製した。脊髄損傷5日後、標識された細胞は中心管から脊髄白質を中心に広く分布していた。(2)上記脊髄損傷モデルを作製し、経時的に灌流固定を行ない、中間径フィラメントであるネスチンの抗体を用いて免疫染色を行った。脊髄損傷後、損傷部位を中心にネスチンの発現が増加していた。(3)ネスチン蛋白のpromoter enhancerを用いて、神経幹細胞に特異的に感染するアデノウイルスベクターを作製した。さらに遺伝子発現を増強するためにcre/LoxP on/off Switching systemを組み合わせた。このアデノウイルスベクターを正常ラットの側脳室へ注入し、脳室および脊髄中心管の上衣細胞に広く感染させることを試みた。Adultラットの側脳室に上記ベクターを109pfu注入し、脊髄をとり出し、LacZ染色を行なった。脊髄中心管の上衣細胞が青く染まり、アデノウイルスベクターが同細胞に感染したことを確認した。

(1) after the spine, the central tube of the spine, the top cell (the cell), the dynamics, the light pigment DiI, the cell, the cell. The spinal cord was cut off in the center of the spinal cord, and the microscissors was cut off. Five days later, the center of the ridge is distributed in the center. (2) the upper spinal cord was used as a vehicle, the perfusion was fixed at the time, and the middle diameter was fixed. The antibody was detected by immunostaining. After the pain in the spine, there is a slight increase in the center of the spine. (3) the protein promoter enhancer is used to infect the cells of the mother mother and the god. In order to improve the performance of the cre/LoxP on/off Switching system system, we need to improve the performance of the system. We need to know that the room is infused and that the central canal of the spinal cord is infected with infection. In the Adult room, the injection of 109pfu, the exit of the spine, and the staining of LacZ were observed. In the central canal of the spine, the coat is stained and stained, and the cell is infected with the same cell.

项目成果

Satoshi Kobayashi et al.: "Drebrin expression is increased in spinal motoneurons of rats after axotomy"Neuroscience Letters. 311. 165-168 (2001)

Satoshi Kobayashi 等人：“轴突切除术后大鼠脊髓运动神经元中的 Drebrin 表达增加”《神经科学快报》。