胃壁細胞H^+/K^+ ATPaseの制御機構

胃壁细胞H^+/K^+ ATP酶的调控机制

• 批准号: 01641523
• 负责人: 二井 將光
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-01641523/
• 关键词: H^+; K^+ ATPase; ATP; 胃酸分泌

胃壁細胞に存在するH^+/K^+ATPaseは、細胞外にH^+を輸送し、これと交換に細胞内にK^+を輸送している。このATPaseの活性は神経、ホルモンおよびヒスタミンにより調節されていることが知られているが、詳細な機構は不明である。胃酸としてのH^+の分泌、細胞内イオンの恒常性の両面から考え、本酵素の調節制御機構は重要である。本研究では、酵素タンパクに対する調節および遺伝子の発現の制御の両面から解析を行った。主な成果を以下に要約する。1.ブタの胃壁細胞より本酵素を調製し、化学修飾の手法によって、Lys-497残基が活性中心の一部であることを示した。2.胃壁細胞の細胞質分画より本酵素を阻害する蛋白質を同定し、部分精製した。3.昨年度ブタ胃壁細胞より得たH^+/K^+ATPaseをコ-ドするcDNAを用い、CHO-K1細胞に於て発現するための予備実験を行った。4.ヒトの遺伝子ライブラリ-よりH^+/K^+ATPaseをコ-ドする遺伝子をクロ-ン化し、全塩基配列を決定した。H^+/K^+ATPaseの遺伝子のエクソン/イントロン配列は1個所をのぞきNa^+/K^+ATPaseと同じであった。5.H^+/K^+ATPase遺伝子のプロモ-タ-部位を、レポ-タ-遺伝子の上流にクロ-ン化し、発現の調節を解析した。その結果、H^+/K^+ATPaseの臓器特異的発現に関与すると考えられる配列が明らかとなった。その配列の中にはペプシノ-ゲン遺伝子の上流配列とよく似た配列が2個所存在した。以上、本研究は所期の計画どおりに進行した。

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项目成果

Yoshinori Moriyama: "Presence of 5'-hydroxytryptamine(serotonine)transport coupled with vacuolar type H^+-ATPase in neurosecretory granules from bovine posterior pituitary." The Journal of Biological Chemistry. 265. (1990)

Yoshinori Moriyama：“牛垂体后叶神经分泌颗粒中存在 5-羟色胺（血清素）转运与液泡型 H+-ATP 酶结合。”

Masatomo Maeda: "Structural analsis of gastic (H^++K^+)ATPase" Annals of the New York Academy of Sciences. 402. 204-207 (1990)

Masatomo Maeda：“胃 (H^K^)ATP 酶的结构分析”纽约科学院年鉴。

Shigehiko Tamura: "Pig gastric(H^++K^+)ATPase:Lys-497 conserved in cation transporting ATPases in modified with pyridoxal 5'-phosphate." The Journal of Biological Chemistry. 264. 8580-8584 (1989)

Shigehiko Tamura：“猪胃 (H^ K^ )ATP 酶：Lys-497 在用吡哆醛 5-磷酸修饰的阳离子转运 ATP 酶中保守。”

Masatomo Maeda: "Human gastric(H^++K^+)-ATPase gene:Similarity to(Na^++K^+)ATPase genes in exon/intron organization but difference in control region." The Journal of Biological Chemistry. 265. (1990)

Masatomo Maeda：“人胃 (H^ K^ )-ATPase 基因：与 (Na^ K^ )ATPase 基因在外显子/内含子组织中相似，但在控制区域存在差异。”