ATP駆動型プロトントランスポーターとCI-チェンネルの構造・機能・協関

ATP 驱动的质子转运蛋白和 CI 通道的结构、功能和关联

• 批准号: 09257228
• 负责人: 二井 將光
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09257228/
• 关键词: F_0F_1ATPase; プロトンチャネル; F_0; 液胞型ATPase; 線虫; クロライドチャネル

ATPの分解によって駆動されるプロトントランスポーターとクロライドチャネルについて詳細な研究を展開し、以下にまとめた主な成果を得た。1)F_0F_1ATPaseのプロトン・チャネル部分であるF_0部分を精製し、リポソームに埋め込み原子力間顕微鏡によって観察した。その結果、直径約130Åで中央部に深さが約18Åのくぼみがある構造を観察した。原子力間顕微鏡の限界を考慮し、この構造がF_0であることを確認した。さらにF_0を形成しているサブユニットの一つであるaサブユニットについて膜外にあると推定される四個所に対応するSite-directed抗体を作成し、F_0部分に関する反応性を検討した。これらの結果から3種のサブユニットからなるF_0部分のモデルを提出した。2)リソソーム、エンドソームに局在する液胞型プロトンポンプが膀胱の最表層の細胞に存在することを示した。このポンプが実際に尿を酸性化していることを示した。3)線虫においては3つの遺伝子(vha1,vha2,vha3)が液胞型プロトン・ポンプ(液胞型ATPase)のプロトン・チャネルをコードしていること、これらが線虫の発生に伴なってStage-Specificに、しかも細胞特異的に発現しているを示した。さらに線虫に存在するClC型のクロライドチャネルに対応するcDNAをすべてクローン化し、これらの機能を解析した。

ATP decomposition is the most important part of ATP decomposition. 1) F_0 F_1 ATPase was purified and observed by atomic force microscope. As a result, the structure with a diameter of about 130 inches and a depth of about 18 inches in the center is observed. Atomic force microscopy is considered and the structure is confirmed. F_0 is formed in the middle of the membrane, and four Site-directed antibodies are estimated to be generated. The result of this is that there are three kinds of 2) The presence of cellular proteins in the outermost layer of the bladder is indicated by the presence of proteins in the bladder. This is the first time that I've ever been in a room. 3)The development of mitochondrial enzymes (vha1,vha2,vha3) is accompanied by Stage-Specific and cell-specific development. C1C-type cDNA for the expression of genes and their function analysis

项目成果

R.Nakagawa, R.Sato, M.Futai, H.Yokosawa and M.Maeda: "Gastric GATA-6 DNA-binding protein : proteolysis induced by CAMP." FEBS Lett.408. 301-305 (1997)

R.Nakakawa、R.Sato、M.Futai、H.Yokosawa 和 M.Maeda：“胃 GATA-6 DNA 结合蛋白：CAMP 诱导的蛋白水解。”

T.Yoshida, R.Sato, S.Mathmdod, S.Kawasaki, M.Futai and M.Maeda: "GATA-6 DNA binding protein expressed in human gastric adenocarchoma MKN45 cells" FEBS Lett. 414. 333-337 (1997)

T.Yoshida、R.Sato、S.Mathmdod、S.Kawasaki、M.Futai 和 M.Maeda：“人胃腺瘤 MKN45 细胞中表达的 GATA-6 DNA 结合蛋白”FEBS Lett。

H.Yamada, S.Yatsushiro, A.Yamaomoto, M.Hayashi, T.Nishi, M.Futai, A.Yamaguchi and Y.Moriyama: "Functional Expression of a GLT-1 type Na-dependent glutamate transporter in rat pinealocytes." J.Neurochemistry. 69. 1491-1498 (1997)

H.Yamada、S.Yatsushiro、A.Yamaomoto、M.Hayashi、T.Nishi、M.Futai、A.Yamaguchi 和 Y.Moriyama：“大鼠松果体细胞中 GLT-1 型 Na 依赖性谷氨酸转运蛋白的功能表达。

S.Ueno, K.Takeda, F.Izumi, M.Maeda, M.Futai, W.Schwarz and M.Kawamura: "Assembly of the chimeric Na^+/K^+-ATPase β-subunit with the Na^+/K^+-ATPase α-subunit : The N-terminal cytoplasmic domain of the β-subunit is interchangeable" Biochem.Biophys.Acta.133

S.Ueno、K.Takeda、F.Izumi、M.Maeda、M.Futai、W.Schwarz 和 M.Kawamura：“嵌合 Na^+/K^+-ATPase β 亚基与 Na^+ 的组装/K^+-ATPase α 亚基：β 亚基的 N 末端胞质结构域是可互换的”Biochem.Biophys.Acta.133

Y.Sambongi, T.Wakabayashi, T.Yoshimizu, H.Omote, T.Oka and M.Futai: "Caenorhabditis elegans cDNA for menkes/Wilson disease gene homologue and its function in yeast CCC2 gene deletion mutant" J.Biochem.121. 1169-1175 (1997)

Y.Sambongi、T.Wakabayashi、T.Yoshimizu、H.Omote、T.Oka 和 M.Futai：“门克斯/威尔逊病基因同源物的秀丽隐杆线虫 cDNA 及其在酵母 CCC2 基因缺失突变体中的功能”J.Biochem.121