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画像・電気信号マルチ計測による膜融合の微視的研究

画像・電気信号マルチ計測による膜融合の微視的研究
使用图像和电信号的多次测量对膜融合进行显微研究
批准号：
01659508
负责人：
曽我部 正博
金额：
$1.15万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1989
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1989 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-01659508/
关键词：
膜融合画像処理膜容量同時測定パッチクランプビデオマイクロスコピ-

项目摘要

项目成果

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本研究の目標は申請者が開発中のマルチ計測光学顕微鏡を開いて、シナプス小胞程度のサイズ(0.1_Cum)をもつ膜小胞一個の膜融合のの過程をパッチクランプ下で、画像、容量、電流の各パルメ-タ-を同時測定して微視的に解析することである。本年度は主としてそのハ-ドウェア部分の完成を目指して、以下に述べるような性能を得ることができた。(1))ビデオマイクロスコピイ:市販の倒立型顕微鏡(オリンパスIMT-II)の光学部分を改良し、高感度CCDカメラ、イメ-ジインテンシファイヤ-と組み合わせることにより、最終倍率5万倍(約10mm/Px)の画像を得ることができた。視認可能なサイズは約50nm程度であるが、コンピュ-タ画像処理により10nm程度の変位検出が可能であり、シナプスト胞程度の粒子の動きや形の変化が追附可能となった。(2)膜容量、膜電流の計測:10KHg(20mV)の生弧波で2相ロックインアップを駆動し、これをパッチクランプアップの保持電位に付加することにより、1fF/200mV感度で膜容量の変化を測定することができた。雑音は0.1fF以下なので、直径0.1μm程度の膜小胞一個の融合に伴なう膜容量化(>0.1fF)を直接測定することが可能となった。また電流出力を2KHgのロ-パスフィルタ-で分離することにより、抵抗変化に基づく膜電流を同時測定することができるようになった。以上のように、画像、容量、電流の三つのパラメ-タがほぼ目標としていた感度で同時測定できるようになった。今後はこれらを統合、解析するソフトウェアを完成させるとともに実際の膜融合に応用してその微視的解析を進めていきたい。
期刊论文(16)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Sokabe,M.: "The structure and dynamics of patch clamped membranes" J.Cell Biol.
Sokabe,M.：“膜片钳膜的结构和动力学”J.Cell Biol。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Sokabe,M.: "Effects of cyclic nucleotides and calcium on transduction and encoding processes in frog muscle spindle" Brain Res.443. 254-260 (1988)
Sokabe,M.：“环核苷酸和钙对青蛙肌梭转导和编码过程的影响”Brain Res.443。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Sokabe,M.: "Towards a quantitative study of stretch activated channel.In“Comparative Aspects of Mechanoreceptor Systems"(in prep.)" Springer Verlag(Heidelberg),
Sokabe, M.：“对拉伸激活通道进行定量研究。在“机械感受器系统的比较方面”（准备中）”Springer Verlag（海德堡），
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Ito,F.: "Effects of intracellular calcium on the frog muscle spindle in relation to cyclic AMP action.In "Mechanoreceptor"" Plenum Press, pp195-199 (1988)
Ito,F.：“细胞内钙对青蛙肌梭的影响与环 AMP 作用有关。在“机械感受器”中”Plenum Press，第 195-199 页（1988 年）
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
共 6 条
    SAチャネルの構造-活性連関と活性化における細胞骨格の役割解析
    • 批准号：
      16207007
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
    • 资助金额：
      $12.31万
    • 财政年份：
      2004
    • 负责人：
      曽我部 正博
    • 依托单位：
      Nagoya University
    細胞骨格がメカノセンサーであることを検証する研究
    • 批准号：
      16657055
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Exploratory Research
    • 资助金额：
      $2.18万
    • 财政年份：
      2004
    • 负责人：
      曽我部 正博
    • 依托单位：
      Nagoya University
    高速単一細胞伸展装置の開発
    • 批准号：
      13878134
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Exploratory Research
    • 资助金额：
      $1.28万
    • 财政年份：
      2001
    • 负责人：
      曽我部 正博
    • 依托单位：
      Nagoya University
    伸展刺激による血管内皮細胞リモデリングの分子機構-インテグリン動態の解析-
    • 批准号：
      12032207
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
    • 资助金额：
      $1.15万
    • 财政年份：
      2000
    • 负责人：
      曽我部 正博
    • 依托单位：
      Nagoya University
    海外基金