粘着斑分子动力学和酪氨酸磷酸化的实时成像-猫眼课题宝

粘着斑分子动力学和酪氨酸磷酸化的实时成像

批准号：

09273223

负责人：

曽我部正博

金额：

$1.34万

依托单位：

Nagoya University

依托单位国家：

日本

项目类别：

Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas

财政年份：

1997

资助国家：

日本

项目状态：

已结题

起止时间：

1997 至 --

来源：

https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09273223/

关键词：

血管内皮細胞伸展刺激形態応答接着斑分子リアルタイムイメージング近接場顕微鏡

项目摘要

项目成果

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英文摘要

血管内皮細胞は一般的に紡錘形を呈し、血管走行に対してその長軸を平行に配列している。この形態や配列は血流に対する機械的抵抗を減弱し、内皮細胞の血管壁からの剥離を防ぐという大切な意義がある。これまでに血流や血管伸展等の機械刺激がこの形態や配列を導くこと、細胞骨格や接着斑分子、あるいは接着斑蛋白質のチロシン燐酸化が形態決定に重要であることが示唆されている。本研究の目的は、シリコン膜上に培養したヒト血管内皮細胞(HUVECs)を用いて、1軸周期伸展刺激(血管拡張刺激に相当)による形態配列応答の分子機構を、分子生物学とイメージング技術を駆使して明らかにするとともに、信号伝達分子のリアルタイムイメージング法を開発することにある。今年度は特にチロシンキナーゼsrcとその標的蛋白質である接着斑キナーゼ(FAK)に注目して解析し、以下の結果を得た。(1)アンチセンス等の分子生物学的手法により、形態反応には、srcの活性化とFAKのチロシン燐酸化が必須であることを発見した。(2)免疫抗体染色法により、この両者の空間分布が形態や細胞骨格と強い相関を持って変化することが分かった。(3)両分子の遺伝子のクローニングとシーケンスをほぼ完了し、リアルタイムイメージングに向けてGFP付加遺伝子を構成中である。(4)これらの分子の動態を見るためにの反射干渉顕微鏡と全反射型近接場顕微鏡のシステムをほぼ完成し、GFP付加シナプトタグミンをリアルタイムイメージングすることができた。

期刊论文(16)

专著(0)

科研奖励(0)

会议论文

Sokabe,M., Nunogakui,K. & Naruse,K.: "Stretch activated ion channels:Single channel vs.whole cell responses" Progr Cell Res.6. 139-149 (1997)

索卡部，M.，布学院，K.

DOI： --

发表时间：

期刊：

影响因子： --

作者：

[]

通讯作者：

Sokabe,M., Auerbach,A., Sigworth,F. (Eds): ""Towards Molecular Biophysics of Ion Channels"" Elsevier Sci BV,Amsterdam,Netherland, 307 (1997)

索卡贝，M.，奥尔巴赫，A.，西格沃斯，F.

DOI： --

发表时间：

期刊：

影响因子： --

作者：

[]

通讯作者：

Qi Z., Sokabe,M.: "Dynamic properties of individual water molecules in a hydrophobic pore lined with acyl chains : a molecular dynamics study." Biophys Chem. (in press).

Qi Z.，Sokabe，M.：“内衬酰基链的疏水孔中单个水分子的动态特性：分子动力学研究。”

DOI： --

发表时间：

期刊：

影响因子： --

作者：

[]

通讯作者：

Naruse,K., Yamada,T. Sokabe,M.: "Involvement of SA channels in orienting response of cltured endothelial cells to cyclic stretch." Am,J.Physiol.(in press).

成濑，K.，山田，T.

DOI： --

发表时间：

期刊：

影响因子： --

作者：

[]

通讯作者：

Suzuki,M., Naruse,K., Asano,Y., Okamoto,T., Nishikimi,N., Sakurai,Y., Nimura,Y., Sokabe,M.: "Up-regulation of integrin β3 expression by cyclic stretch in human umbilical endothelial cells." Biochem.Biophys.Res.Com.239. 372-376 (1997)

Suzuki, M.、Naruse, K.、Asano, Y.、Okamoto, T.、Nishikimi, N.、Sakurai, Y.、Nimura, Y.、Sokabe, M.：“循环上调整合素 β3 表达人脐带内皮细胞的拉伸。” Biochem.Biophys.Res.Com.239. 372-376 (1997)

DOI： --

发表时间：

期刊：

影响因子： --

作者：

[]

通讯作者：