インタ-ロイキン3受容体の構造とシグナル伝達

IL-3受体结构和信号转导

• 批准号: 02256214
• 负责人: 矢原 一郎
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-02256214/
• 关键词: インタ-ロイキン3; インタ-ロイキン3受容体; アンチセンスRNA法; GMーCSF; モノクロ-ナル抗体

1)マウスILー3受容体のILー3結合部位であるAicー2抗原のCDNA由来の各種テラクメントをアンチセンスRNA鎖が発現するようにプラスミッドに組み込み、ILー3依存性(同時にGMーCSF依存性でもある)株細胞IC2に導入した。細胞表面に発現するAicー2抗原が少いトランスフォ-マントを各種選択した。これらはいずれもAicー2抗原mRNAの量が少く、そのある株では実際にアンチセンスRNAがS1マッピング法によって検出された。最もAicー2抗原の発現が少い株では実際にアンチセンスRNAは検出できなかったが、これはアンチセンスRNAがすべて使われてしまったためと考えられる。Aicー2抗原の発現量の少い株は、ILー3に対する応答が悪く、増殖するためには非常に高濃度のILー3を必要とした。しかし、同じ株はGMーCSFに対しては元の株とまったく同じに応答するので、Aicー2抗原はILー3に対する特異的レセプタ-と結論できた。また、 ^<125>I標識ILー3を細胞に結合させた後で化学的架橋を行うと3ないし4本のバンドが得られるが、これらはすべてAicー2抗原アンチセンスRNAを発現する細胞では減少していた。これらの結果は、Aicー2抗原がすべてのILー3レセプタ-にかかわっていることを意味している。2)ILー3受容体はAicー2抗原を含む複数のポリペプチド鎖によって構成されている可能性が高いので、様々な基準によって新しいモノクロ-ナル抗体を新に単離した。それらの基準は、ILー3応答性の消失、ILー3結合の阻害、Aicー2抗原に対する別種の抗体(免疫沈澱が可能な)などである。既に幾つかの候補を得た。

1) マ ウ ス IL ー 3 by let body の IL ー 3 combining site で あ る Aic ー の 2 antigen CDNA origin の various テ ラ ク メ ン ト を ア ン チ セ ン ス RNA lock が 発 now す る よ う に プ ラ ス ミ ッ ド に group み 込 み, IL ー 3 dependency (and に GM ー CSF dependency で も あ る) plant cells IC2 に import し た. The cell surface に shows するAic <s:1> 2 antigen が, there is a small amount of <s:1> トラ スフォ スフォ- トを トを トを various choices 択 た た. こ れ ら は い ず れ も Aic ー 2 antigen mRNA の fewer が く, そ の あ る strains で は be interstate に ア ン チ セ ン ス RNA が S1 マ ッ ピ ン グ method に よ っ て 検 out さ れ た. Most も Aic ー 2 antigen の 発 が now less い strains で は be interstate に ア ン チ セ ン ス RNA は 検 out で き な か っ た が, こ れ は ア ン チ セ ン ス RNA が す べ て make わ れ て し ま っ た た め と exam え ら れ る. Aic ー 2 antigen の 発 now fewer の い plant は, IL ー 3 に す seaborne る 応 answer が 悪 く, raised colonization す る た め に は very high concentrations に の IL ー 3 を necessary と し た. し か し, with じ は GM ー CSF に し seaborne て は yuan の strains と ま っ た く with じ に 応 answer す る の で, Aic ー 2 antigen は IL ー 3 に す seaborne る specific レ セ プ タ - と conclusion で き た. ま た, ^ < 125 > I identify IL ー 3 に を cells combined with さ せ た で chemical bridging after line を う と 3 な い し 4 this の バ ン ド が have ら れ る が, こ れ ら は す べ て Aic ー 2 antigen ア ン チ セ ン ス RNA を 発 now す る cells で は reduce し て い た. こ れ ら の ー 2 results は, Aic antigen が す べ て の IL ー 3 レ セ プ タ - に か か わ っ て い る こ と を mean し て い る. 3 by 2) IL ー let body は Aic ー contains 2 antigen を む plural の ポ リ ペ プ チ ド lock に よ っ て constitute さ れ て い likely が る い の で, others 々 な benchmark に よ っ て new し い モ ノ ク ロ - ナ ル antibody を new に 単 from し た. そ れ ら の benchmark は, IL ー 3 応 answer の disappear, IL ー ー 2 3 combined の resistance against, Aic antigen に す seaborne る other の antibody (immune precipitates が may な な ど で あ る. That is, に several に を を the candidate を is た.

项目成果

Y.Miyata & I.Yahara: "Cytoplasmic 8Sーglucocorticoid receptor ibinds actin filaments through the HSP90 moiety." Journal of Biological Chemistry. 266. (1991)

Y.Miyata 和 I.Yahara：“细胞质 8S-糖皮质激素受体通过 HSP90 部分结合肌动蛋白丝。”《生物化学杂志》266。

M.Takahashi et al.: "Molecular bssis for determining the sensitivity of eucaryotes to the antimitotic drug rhizoxin." Molecular General Genetics. 222. 169-175 (1990)

M.Takahashi 等人：“确定真核生物对抗有丝分裂药物根毒素敏感性的分子基础。”

S.Yonehara et al.: "Identification of a cell surface 105kd protein(Aicー2 antigen)which binds interleukin 3." International Immunology. 2. 143-150 (1990)

S. Yonehara 等人：“结合白介素 3 的细胞表面 105kd 蛋白（Aic-2 抗原）的鉴定”，《国际免疫学》2. 143-150 (1990)。

S.Natori and I.Yahara: "Mycotoxins(分担執筆:Cytochalasins)" CRC Press,Inc., (1991)

S. Natori 和 I. Yahara：“霉菌毒素（合著者：细胞松弛素）” CRC Press, Inc., (1991)

S.Koyasu et al.: "The expression of ILー2R alphaーchain is enhanced by activation of adenylate cyclase in large granular lymphocytes and natural killer cells." Journal of Immunology. 146. 233-238 (1991)

S. Koyasu 等人：“大颗粒淋巴细胞和自然杀伤细胞中腺苷酸环化酶的激活增强了 IL-2R α 链的表达。”《免疫学杂志》146. 233-238 (1991)。