がん細胞の特性を決定する細胞骨格異常の生化学的解析

确定癌细胞特征的细胞骨架异常的生化分析

• 批准号: 03151076
• 负责人: 矢原 一郎
• 金额: $ 12.48万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03151076/
• 关键词: アクチン; 細胞骨格; 細胞接着; チロシンリン酸化; がん細胞の分化; 微小管; ポリホスホイノシタイド; 中間フィラメント

(1)細胞接着構造における各種細胞骨格タンパク質(アクチン、ミオシン、トロポミオシン、カルデスモン等)の分布局在が細胞がん化によってどのように変化するかを明らかにした(祖父江)。(2)細胞接着部位の内側に存在するタンパク質ラディキシンの構造と機能を解析し、それがチロシンキナ-ゼのよい基質であるエズリンとよく似ていることを見出した(月田)。(3)カドヘリンおよびカテニンのチロシンリン酸化と細胞がん化の間に密接な関係があることを見出した(浜口)。(4)pp60ー^<vーsrc>の機能発現にアクチン結合能をもつストレスタンパク質HSP90が必要であることをインビトロ系で明らかにした(矢原)。(5)リポコルキンIとPKC基質であるMARCKSがカルシウムイオノフォアやTPAによって細胞質から膜へ移行することを見出した(大和田)。(6)グリアフィラメントの構成タンパク質の4つのリン酸化部位のアミノ酸を同定し、インビトロのリン酸化実験より、それらのリン酸化を行うタンパク質キナ-ゼを同定した。このとき、それぞれのリン酸化部位を特異的に認識するモノクロ-ナル抗体を用いた(稲垣、松岡)。(7)M1白血病細胞の分化にともなって発現するビメンチン遺伝子のプロモ-タ-領域を詳細に解析し、分化時に発現を支配するシス領域を同定した(永田)。(8)トランスフォ-ムすると発現しなくなるcDNAクロ-ンを5つ得たところ、カルパクチンIとミオシン調節軽鎖のものがあった(崎山)。(9)細胞周期が間期からM期に入るとき微小管構築が著しく変化するが、それに関与するMAPキナ-ゼの基質となるMAP(p220)を同定した(酒井)。(10)PIP_2がαーアクチニンに結合すると、アクチンゲル化能を著しく促進することを見出した。またこの結果は抗PIP_2抗体によるPIP_2結合αーアクチニンの分布局在をよく説明する(深見)。

(1) cells and then construct に お け る various cells bone タ ン パ ク mass (ア ク チ ン, ミ オ シ ン, ト ロ ポ ミ オ シ ン, カ ル デ ス モ ン etc) の distribution bureau in が cell が ん change に よ っ て ど の よ う に variations change す る か を Ming ら か に し た jiang (grandfather). (2) cells and then the inside parts の に exist す る タ ン パ ク qualitative ラ デ ィ キ シ ン の tectonic analytical し と function を, そ れ が チ ロ シ ン キ ナ - ゼ の よ い matrix で あ る エ ズ リ ン と よ く like て い る こ と を shows し た (field). (3) カ ド ヘ リ ン お よ び カ テ ニ ン の チ ロ シ ン リ ン acidification と cells が ん change between の に contact な masato is が あ る こ と を shows し た (city). (4) pp60 ー ^ < v ー SRC > の function 発 now に ア ク チ ン binding energy を も つ ス ト レ ス タ ン パ ク qualitative HSP90 が necessary で あ る こ と を イ ン ビ ト ロ で and Ming ら か に し た (arrow). (5) リ ポ コ ル キ ン I と PKC matrix で あ る MARCKS が カ ル シ ウ ム イ オ ノ フ ォ ア や TPA に よ っ て cytoplasm か ら membrane へ transitional す る こ と を shows し た (wada). (6) グ リ ア フ ィ ラ メ ン ト の constitute タ ン パ ク qualitative の 4 つ の リ ン acidification parts の ア ミ を ノ acid with し, イ ン ビ ト ロ の リ ン acidification be 験 よ り, そ れ ら の リ ン acidification を line う タ ン パ ク qualitative キ ナ - ゼ を with fixed し た. こ の と き, そ れ ぞ れ の リ ン acidification parts を specific に know す る モ ノ ク ロ - ナ を ル antibody with い た (稲 walls, matsuoka). (7) M1 の leukemia cell differentiation に と も な っ て 発 now す る ビ メ ン チ ン posthumous son 伝 の プ ロ モ を タ - field detailed analytical し に, differentiation に 発 を now dominate す る シ を ス field with constant し た (field). (8) ト ラ ン ス フ ォ - ム す る と 発 now し な く な る cDNA ク ロ - ン を five つ た と こ ろ, カ ル パ ク チ ン I と ミ オ シ ン adjust 軽 lock の も の が あ っ た (mountains). (9) the cell cycle phase between が か ら M phase に into る と き tiny tube building が the し く variations change す る が, そ れ に masato and す る MAP キ ナ - ゼ の matrix と な る MAP (p220) with fixed を し た (sakai). (10) PIP_2 が alpha ー ア ク チ ニ ン に combining す る と, ア ク チ ン ゲ ル change can を し く promote す る こ と を shows し た. The results of また <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> the distribution of <s:1> anti-pip_2 antibody によるPIP_2 binding α ア ア チニ <s:1> are located in をよく, indicating する(see further).

项目成果

Gotoh,Y.,Sakai,H.et al: "Xenopus M phase MAP kinase;Isolation of its cDNA and activation by MPF" EMBO Journal. 10. 2661-2668 (1991)

Gotoh,Y.,Sakai,H.等人：“非洲爪蟾 M 期 MAP 激酶；其 cDNA 的分离和 MPF 的激活”EMBO 杂志。

Minami,Y.,Yahara,I.et al.: "Analysis of native forms and their isoform compositions of the mouse 90-kDa heat shock protein,HSP90." Jouranl of Biological Chemistry. 266. 10099-10103 (191)

Minami,Y.,Yahara,I.et al.：“小鼠 90-kDa 热休克蛋白 HSP90 的天然形式及其亚型组成的分析。”

Nishizawa,K.,Inagaki,M.et al.: "Specific localization of phospho-intermediate filament protein in the constricted area of dividing cells." Journal of Biological Chemistry. 266. 3074-3079 (1991)

Nishizawa,K.,Inagaki,M.等人：“磷酸中间丝蛋白在分裂细胞收缩区域的特异性定位。”

Sato,N.,Tsukita,Sa.et al.: "Radixin,a barbed-end capping actin modulating protein,is concentrated at the cleavage furrow during cytokinesis." Journal of Cell Biology. 113. 321-330 (1991)

Sato,N.,Tsukita,Sa.等人：“Radixin，一种有倒刺末端加帽的肌动蛋白调节蛋白，在胞质分裂过程中集中在卵裂沟处。”

Sobue,K.et al.: "Caldesmon,a novel regulatory protein in smooth muscle actomyosin system." Journal of Biological Chemistry. 266. 12115-12118 (1991)

Sobue, K. 等人：“Caldesmon，平滑肌肌动球蛋白系统中的一种新型调节蛋白。”