発がんプロモ-ションにおけるシグナル伝達と遺伝子発現の解析

致癌促进过程中的信号转导和基因表达分析

• 批准号: 02262207
• 负责人: 黒木 登志夫
• 金额: $ 9.6万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-02262207/
• 关键词: Cキナ-ゼ; カルシウム非依存性Cキナ-ゼ; 発がんプロモ-ション; 発がんプロモ-タ-; 皮膚; ケラチノサイト; リン酸化標的タンパク; 遺伝子発現

本研究では、多段階発がんのメカニズムを発がんプロモ-ション期とプログレッション期に焦点をしぼり、次の3つの研究目標のもとに研究を進めた。1.皮膚での発現しているCキナ-ゼ分子種の同定:マウス皮膚nPKCηを分離した。nPKCηはカルシウム結合領域であるC2領域を欠き、C1(システイン・リッチ・レピ-トを含む調節領域)とC3(活性領域)からなるカルシウム非依存性Cキナ-ゼ(nPKC)の構造をもっていた。nPKCηは他のCキナ-ゼ分子種と異なり、肺と皮膚に強く発現していた。マウスCキナ-ゼの各分子種を新たに分離し、マウス皮膚で発現しているCキナ-ゼを系統的に検索した結果、nPKCηが皮膚の主要な分子種であることが判明した。2.マウス皮膚のCキナ-ゼ標的タンパク質の同定:マウス皮膚および培養ケラチノサイトではp80、p70、p40、p34、p28の5種のタンパクがCキナ-ゼの標的タンパクである このうち、p70が核基質の一つ、ラミンBであることを同定した。ラミンBは酸性度の異なる二つのスポットB1、B2に分れるが、Cキナ-ゼでリン酸化されるのはB2であった。3.発がんプロモ-ションに伴う遺伝子発現の変化:発がんプロモ-タ-は各種の遺伝子の発現を誘導する。パピロ-マがんでは、そのうち、TPAによって遅れて誘導される二次反応性が恒常的に発現していた。Cキナ-ゼ遺伝子の中では、nPKCσががんで2倍高い発現がみられた。皮膚特異的Cキナ-ゼnPKCηの発現には変化がなかった。

This study is aimed at the development of multi-stage development, focusing on the development of multi-stage development. 1. Skin development and identification of molecular species: skin nPKCη isolation The structure of nPKCη is composed of C2 domain, C1 domain, C3 domain, C1 domain, C2 domain, C1 domain, C1 domain, C2 domain, C3 domain, C1 domain, C2 domain, C3 domain, C3 domain, C1 domain, C2 domain, C3 domain, C4 domain, C3 domain, C4 domain, C5 domain, C6 domain, C7 domain, C7 domain, C8 domain, C9 domain, nPKC ηThe molecular species of PKC were newly isolated, and the main molecular species of PKC were identified 2. The same quality of C B is acidic and B is acidic. B is acidic and B is acidic. C is acidic and B is acidic. 3. The development of a variety of genes: the development of a variety of genes to induce the development of TPA is the second most common form of chemical reaction. C- Skin-specific C-nPKCη occurs and changes.

项目成果

Chida,K.: "Purification and identification of creatine phosphokinase B as a substrate of protein kinas C in mouse skin in vivo." Biochem.Biophys.Res.Commun.173. 351-357 (1990)

Chida,K.：“作为小鼠皮肤体内蛋白激酶 C 底物的肌酸磷酸激酶 B 的纯化和鉴定。”

Hashimoto,Y.: "Elevated expression of secondary,but not early,responding genes to phorbol ester tumor promoters in papillomas and carcinomas of mouse skin." Mol.Carcinogenesis. 3. 302-308 (1990)

Hashimoto，Y.：“在小鼠皮肤乳头状瘤和癌中，佛波酯肿瘤启动子的次级反应基因表达升高，但早期反应基因不表达。”

Karasawa,M.: "Localization of metallothionein in hair follicles of normal skin and the besal cell layer of hyperplastic epidermis:Possible association with cell ptoliferation." J.Investigative Dermatology. (1991)

Karasawa,M.：“金属硫蛋白在正常皮肤的毛囊和增生性表皮的贝萨尔细胞层中的定位：可能与细胞增殖有关。”

Nose,K.: "Isolation of a gene sequence induced later by tumor promoting 12ーOーtetradecanoylphorbolー13ーacetate in mouse osteoblastic c^^ーells (MC3TーE1)and expressed constitutively in <ras>___ーーtransformed cells." Cell Growth and Differentiation. 1. 511-518

Nose, K.：“随后在小鼠成骨细胞 (MC3T-E1) 中分离出由促进肿瘤的 12-O-十四烷酰佛波醇-13-乙酸酯诱导的基因序列，并在 <ras>___ 转化细胞中组成型表达。 “细胞生长和分化。1. 511-518

Osada,S.: "A phorobol ester receptor/protein kinase,nPKCη,a new member of the protein kinase C family predominantly expressed in lung and skin." J.Biol.Chem.265. 22434-22440 (1990)

Osada, S.：“佛波醇酯受体/蛋白激酶，nPKCη，主要在肺和皮肤中表达的蛋白激酶 C 家族的新成员。”J.Biol.Chem.265 (1990)。