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金属蛋白質の多元的構造と反応過程制御

金属蛋白的多维结构和反应过程的控制

基本信息

批准号：
03241103
负责人：
森島績
金额：
$ 11.97万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は以下の点について研究を行なった。1ミオグロビンにおける配位子結合機構の制御因子ミオグロビンは生体内で酸素貯蔵の機能を果たしており、酸素の可逆的な結合が可能である。本研究では酸素などの配位子結合に大きな影響を与えると考えられているヘム近傍の疎水性クラスタ-に注目し、その中に存在するLeu29、Leu72、Leu104、Val66を立体障害の異なる他の疎水性アミノ酸残基に置換した。その結果、29位のLeuを置換すると酸素や一酸化炭素の再結合反応速度が著しく遅くなり、また配位子の結合構造も変化することが明らかになった。つまり、この部位がLeuであることにより、配位子結合を加速されるものと結論づけられた。2アミノ酸置換チトクロ-ムP450の酸素添加機能チトクロ-ムP450の酸素添加機能の解明のため我々は252位のThrに注目し、この水酸基を消失させたAlaに置換したところ基質への酸素添加が阻害されヘム鉄に配位した酸素は過酸化水素として放出されることを明かにしてきた。今回その252位の近傍で、酸素結合部位を形成するために重要と考えられている、Lys178ーAsp251ーArg186のイオンペアを切断したところ、特に251位のアミノ酸置換により酸素分子の消費が著しく減少し、この部位のアミノ酸が酸素分子のヘムへの結合に大きく関与していることが明かになった。3チトクロ-ムc3の立体構造解所従来、我々はNMRを用いてチトクロ-ムc3の立体構造解析を行なってきたが、今回、重水素化したアミノ酸を用いることにより、高磁場側に常磁性シフトしたシグナルをヘム鉄に配位したHisのイミダゾ-ル基に由来することを明かにした。更にこれらのシグナルの常磁性シフトの値と4個のヘムの酸化還元電位の検討からそれぞれのヘム近傍構造の推定を試みた。

This year, the following points were investigated. 1. The control factor of ligand binding mechanism is the function of acid storage in vivo, and the reversible binding of acid is possible. In this study, we investigated the effects of ligand binding on acid residues and the presence of Leu29, Leu72, Leu104, Val66 as steric barriers and the substitution of acid residues in other water molecules. As a result, the rate of recombination of the 29-position Leu substitution with the acid and the acidified carbon is increasing, and the binding structure of the ligand is changing. The results show that the ligand binding is accelerated. 2. Acid substitution function of P450 acid addition function of P450 In this paper, the formation of acid binding site near position 252 is important, and the formation of Lys178 Asp251 Arg186 is important. In particular, the formation of acid binding site near position 252 is important, and the formation of acid binding site near position 251 is important. 3. The steric structure analysis of C3 was carried out by NMR, and the origin of iron coordination in the high magnetic field side was clarified. In addition, the magnetic properties of the four compounds were studied and the near structures were estimated.