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高圧NMR法によるタンパク質の動的構造の研究

高压核磁共振法研究蛋白质动态结构

基本信息

批准号：
62220018
负责人：
森島績
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Special Project Research
财政年份：
1987
资助国家：
日本
起止时间：
1987 至 1988
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-62220018/
关键词：
高圧NMR ヘムタンパク質ヘム交換反応ヘム反転反応 NH ND交換の圧力依存性

项目摘要

超伝導高圧NMR法を用いて種々のヘムタンパク質の構造に及ぼす圧力効果を詳細に研究した. 先ずチトクロムCについては, 酸化型では昇圧に伴って, ヘム鉄に配位している第6配位子のメチオニン残基に置換された. 一方還元型では, このようなリガンド交換は全く起らず, ヘムCのプロピオン酸と相互作用しているトリプトファンー59残基のNH【double half arrows】D交換速度が高圧下で著しく減少した. この交換速度の圧力依存性から活性化体積は250〓^3と見積もられた. さらにこのトリプトファンと相互作用しているイソロイシンー57のプロトンNMRシグナルも昇圧と共に選択的にシフトし, これらチトクロムCの電子伝達機能発現上重要と考えられているアミノ酸残基の特異的な圧力依存性は, 高圧下でチトクロムCが酸化され易くなる構造上の要因と考えることができる. また酸化型が高圧下で還元されにくくなることも, 酸化型を安定化するリジンのアミノ基がメチオニンに入れ替ることから説明することができる. またこの高圧NMR法を用いて, アポミオグロビンとヘムとの結合反応速度ならびにミオグロビンのヘムの交換反応速度の圧力依存性を追究した. その結果, 両者において圧力依存性は全く異なり, このことは両反応の機構が異なることを示唆している. すなわち, ヘムポケット内に結合したヘムが反転する反応は, 一度ヘムがタンパク部外に出てアポタンパクを生成するのではなく. タンパク質の構造的ゆらぎによって反転することを示している.

The superconducting NMR method is used to create a variety of experimental equipment and to improve the results of research. In the first place, the acidified compound, the partner, the ligand, the sixth ligand, the residue, the residue. One side of the reductive type, the temperature is very low, and the interaction between acid and acid is very important. The speed of the 59 residue NH [double half arrows] D is higher than that of the other. Intersection Velocity Force dependence Activator 250 ^ 3 intersecting speed force dependence. This is an important test for the strength dependence of acid residues on the selected NMR computers, which have been selected for the first time. Under the high temperature, it is necessary to acidify the acid and make it because of the test. The acidizing system is stable, and the acidizing system is stable. The acidizing system is stable and stable. The high-speed NMR method is used to determine the speed, the speed and the force dependence. According to the results of the test, the strength dependence of the recipient is in full force, and the counter-agency is responsible for the instigation of the situation. In this case, you have to make sure that you have a problem with each other, so that you can make sure that you are not in a position to make an error. Please tell me that you have not made any mistakes.