酵母ミニ染色体の分配に関与する遺伝子の解析

酵母微染色体分离相关基因的分析

• 批准号: 03256201
• 负责人: 菊池 淑子
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03256201/
• 关键词: 酵母; ミニ染色体; 分配; フォスファタ-ゼ; タンパクリン酸化; 細胞周期; 温度感受性変異

染色体分配機構は複製機構と共に染色体安定保持に直接関わり、細胞増殖過程において重要である。酵母サッカロミセスでは動原体と自律複製能配列を持つミニ染色体は比較的安定に存在しうる。本研究では、温度感受性変異株のうち、ミニ染色体安定保持に温度依存性のあるts12変異株について、その表現型を調べ、遺伝子をクロ-ニング、解析することによって、遺伝子産物の果たす役割りを明らかにすることを目的としている。ts12変異株では、高温との中間温度でミニ染色体が不安定になるばかりでなく、染色体脱落頻度も8倍上昇していた。ts性を相補するDNA断片の一次構造解析から親水性に富む140Kdのタンパクをコ-ドしていることが判ったが、この遺伝子は、最近、発表になったsit4フォスファタ-ゼの欠失変異を抑圧するSSD1,pde2変異をマルチコピ-で抑圧するSRK1と同一遺伝子であった。ts12遺伝子破壊株は細胞致死とはならないが、カフェイン感受性,熱ショック感受性を示した。又,破壊株においても、ミニ染色体の保持率は悪く、これに対して2μプラスミドの分配機構を持つプラスミドの保持率は野生型と変らなかった。従って、動原体の分配に欠損があると考えられる。TS12タンパクに対する抗体を用いてウエスタンブロッティングを行い,170kdのバンドを検出同定した。現在、リン酸化の修飾の有無、複合体形成、さらに、細胞周期との関連について検討中である。

The chromosome distribution mechanism <s:1> replication mechanism と co-に chromosome stability and maintenance に are directly related to わ に, and the cell proliferation process にお て て て is important である. Yeast サッカロ, サッカロ, セスで, <s:1>, the kinetoplasma と can replicate autonomically, coordinate を, hold うる, ニ, ニ chromosomes, <s:1> is relatively stable, に exists in うる. This study で は, temperature sensibility - different strains の う ち, ミ ニ chromosome stability and maintain に temperature dependency の あ る ts12 - different strains に つ い て, そ の phenotype を べ, heritage 伝 son を ク ロ - ニ ン グ, parse す る こ と に よ っ て fruit, but the latter's 伝 の た cut り す "を Ming ら か に す る こ と を purpose と し て い る. Ts12 - different strains で は, high-temperature と の middle temperature で ミ が ニ chromosome instability に な る ば か り で な く, chromosome loss frequency も 8 times rise し て い た. Ts sex を phase fill す る DNA fragment の a structural analysis か ら hydrophilic に rich む 140 kd の タ ン パ ク を コ - ド し て い る こ と が convicted っ た が, こ の heritage 伝 は, recently, 発 table に な っ た sit4 フ ォ ス フ ァ タ - ゼ の owe lost - different を 圧 suppression す る SSD1, pde2 - different を マ ル チ コ ピ - で 圧 suppression す る SRK1 と The same heritage 伝 sub-son であった. Ts12 heritage 伝 son broken 壊 は cell death と は な ら な い が, カ フ ェ イ ン sensitivity, thermal シ ョ ッ ク susceptibility を shown し た. Again, broken 壊 strains に お い て も, ミ ニ chromosome の retention は 悪 く, こ れ に し seaborne て 2 mu プ ラ ス ミ ド の assigned を hold つ プ ラ ス ミ ド の retention は wild-type と - ら な か っ た. Youdaoplaceholder0, motion source <s:1> distribution に underloss があると examination えられる. TS12 タ ン パ ク に す seaborne を る antibody with い て ウ エ ス タ ン ブ ロ ッ テ ィ ン グ を い, 170 kd の バ ン ド を 検 out with fixed し た. Now, the presence or absence of リ <s:1> acidified and modified cells, complex formation, さらに, and the と cell cycle are related to に,, て検, and である.

项目成果

J.Hashimoto: "Isolation and characterization of cDNA clones encoding cdc2 homologues from Oryza sativa:a functional homologue and cognatevariants." Mol.Gen,Genetics. (1992)

J.Hashimoto：“编码来自水稻的 cdc2 同源物的 cDNA 克隆的分离和表征：功能同源物和同源变体。”