基質と酵素間の精密構造認識と反応機構

小倉らは前年度成功した中等度好熱性細菌のファルネシル二リン酸合成酵素の大腸菌における大量発現に引き続き、この耐熱酵素の結晶化に成功した。単結晶の成長は最大0.8mmの長さに達し、X線回折による三次元構造の解析が可能であるという予備的データが得られた。一方、この酵素の一次構造を大腸菌および種々の真核生物由来のそれらと比較しながら、高度に保存されている部位のアミノ酸に着目して部位特異的変異を導入した。得られたさまざまな変異体の触媒機能や耐熱性を調べて、反応機構の理解を飛躍的に深めることができた。左右田らも好熱性細菌由来の酵素を追求し、Bacillus sp.YM-1のD-アミノ酸トランスアミナーゼは大腸菌のL-分岐鎖アミノ酸トランスアミナーゼと高い相同性をもつことを見いだした。また、両酵素反応における補酵素ピリドキサルリン酸のC-4'位水素のプロトン付加および引き抜き反応の立体化学は、いずれの場合も、従来知られるトランスアミナーゼのそれとは逆の面、すなわち、re-面であることを明らかにした。中嶋らは、マストパランのε-ダンシルLys体は特異的にウニ卵受精膜を上昇させることを発見した。また受精膜上昇に伴い、卵内の染色体の凝集も起り、このペプチドが受精卵と類似の卵細胞内変化を惹き起こすことがわかった。三川らは植物に広く存在するフラボノイドの生合成に関与する酵素類の研究を進展させて、カルコン合成酵素、カルコン-フラボン異性化酵素、2-ヒドロキシイソフラボン合成酵素などに関する知見を深めた。

小倉らは前年度成功した中等度好熱性細菌のファルネシル二リン酸合成酵素の大腸菌における大量発現に引き続き、この耐熱酵素の結晶化に成功した。単結晶の成長は最大0.8mmの長さに達し、X線回折による三次元構造の解析が可能であるという予備的データが得られた。一方、この酵素の一次構造を大腸菌および種々の真核生物由来のそれらと比較しながら、高度に保存されている部位のアミノ酸に着目して部位特異的変異を導入した。得られたさまざまな変異体の触媒機能や耐熱性を調べて、反応機構の理解を飛躍的に深めることができた。左右田らも好熱性細菌由来の酵素を追求し、Bacillus sp.YM-1のD-アミノ酸トランスアミナーゼは大腸菌のL-分岐鎖アミノ酸トランスアミナーゼと高い相同性をもつことを見いだした。また、両酵素反応における補酵素ピリドキサルリン酸のC-4'位水素のプロトン付加および引き抜き反応の立体化学は、いずれの場合も、従来知られるトランスアミナーゼのそれとは逆の面、すなわち、re-面であることを明らかにした。中嶋らは、マストパランのε-ダンシルLys体は特異的にウニ卵受精膜を上昇させることを発見した。また受精膜上昇に伴い、卵内の染色体の凝集も起り、このペプチドが受精卵と類似の卵細胞内変化を惹き起こすことがわかった。三川らは植物に広く存在するフラボノイドの生合成に関与する酵素類の研究を進展させて、カルコン合成酵素、カルコン-フラボン異性化酵素、2-ヒドロキシイソフラボン合成酵素などに関する知見を深めた。