核局在化シグナルによって活性化されるキナーゼの同定とその機能解析

核定位信号激活激酶的鉴定及其功能分析

• 批准号: 06262214
• 负责人: 米田 悦啓
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06262214/
• 关键词: 核蛋白質; 細胞周期; 低分子量G蛋白質; シグナル伝達; 核蛋白質輸送; マイクロインジェクション; 核

本研究者はこれまで細胞内情報伝達のメカニズムに興味を持ち、その解析に必要と考えられる細胞質から核への蛋白質の輸送機構の解明を目指してきた。細胞周期を調節するメカニズムの1つとして細胞質から核へのシグナル因子の移行の制御が考えられ、細胞周期の進行に重要な働きをすると考えられるRCC1-Ran/TC4システムに着目して研究を進めてきた。RCC1遺伝子に変異のある温度感受性突然変異細胞株であるtsBN2細胞を用いたこれまでの研究から、主として核内に豊富に存在する低分子量G蛋白質であるRan/TC4が細胞質から核への蛋白質の輸送を制御していることを明らかにしてきた。本年度は、さらにこの研究を押し進め、分子レベルでの詳細な解析を行った結果、以下の事実が明かとなった。1.培養細胞の細胞質に導入したRan/TC4に対する抗体は、核蛋白質の核への移行を阻害した。2.tsBN2細胞を非許容温度下で培養して、核蛋白質の輸送活性が低下している状態で、GTP結合型Ran/TC4を細胞質に導入すると、核蛋白質の輸送活性は回復し、この時Ran/TC4自身も核へ移行することがわかった。野生型の細胞の細胞質GDP結合型Ran/TC4を導入すると、核蛋白質の輸送活性は低下し、この場合、ほとんどのRan/TC4は細胞質に留まったままであった。また、同様に、GTPγSを結合させたRan/TC4を細胞質に導入した場合、核蛋白質輸送は完全に阻害された。以上の事実から、核蛋白質輸送は、Ran/TC4のGTP-GDP交換反応を通して制御を受け、核蛋白質輸送に対して、GTP結合型は促進的に、GDP結合型は抑制的に働くことが明かとなった。今後、この制御機構が細胞周期の進行にどのように働くのかを明らかにしていきたい。

In this study, the information in the cell was reached, the taste was analyzed, and the necessary information was analyzed. The nuclear protein was sent to the organization to explain the target. In terms of cell cycle, cell cycle The temperature sensitivity of the RCC1 cell line was suddenly affected by the temperature sensitivity of the cell line. The tsBN2 cell line was used to study the low molecular weight G protein, the Ran/TC4 protein, the Ran/TC4 protein, the temperature sensitivity, the temperature sensitivity and the temperature sensitivity. The results of this year's study will be reviewed, and the results of the study will be analyzed by molecular analysis. The following events will inform you of the results. 1. Culture cells, cells, Ran/TC4, antibodies, nucleoprotein, nucleosides, migration, blockage, and so on. The 2.tsBN2 cells were incubated at non-capacitive temperature, the nucleoprotein was transferred to low activity, the GTP-combined Ran/TC4 cell was transferred into the cell, the nuclear protein was transferred to the active cell, and the Ran/TC4 itself was transferred to the cell at ambient temperature. The combination of wild-type GDP and GDP-type Ran/TC4 transduced into E. coli, the nucleoprotein delivery activity was low, and the nucleoprotein delivery activity was low. The combination of nucleoprotein and nucleoprotein was detected. In combination with GTP γ S, GTP γ S, and the combination of Ran/TC4 cells, the nucleoprotein was transferred to the target cells to completely block the damage. The above events, nucleoprotein delivery, Ran/ TC4GTP-GDP reverse transcriptional regulation, nucleoprotein transport, GTP-binding promotion, and GDP-binding inhibition are sensitive. From now on, the control organization will carry out the monitoring and control of the cell cycle. in the future, the control agency will make a change in the cell cycle.