インテリジェント型糖質高分子設計による肝細胞の接着・増殖・分化の制御

通过智能碳水化合物聚合物设计控制肝细胞粘附、增殖和分化

• 批准号: 06267207
• 负责人: 赤池 敏宏
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06267207/
• 关键词: 肝細胞; アシアロ糖タンパク質; DNA合成能; PVLA; 胆汁酸形成分; 表面解析法

我々は、肝細胞の生育にとって必須の因子の1つである基質材料(細胞外マトリックス)サイドから、培養肝細胞の増殖と分化機能発現が制御されているのではないかと考え接着基質PVLA上での細胞応答に関する種々の検討を行ってきた。その結果、アシアロ糖タンパク質を単純モデル化した人工基質材料PVLAを開発した。興味深いことにはこのPVLA水溶液(高分子ミセル)のコーティング濃度を変化させることで、培養肝細胞の接着形態が変化し、それとともに増殖能と分化機能が相反的に変化することが明らかになった。PVLAのコーティング濃度を低くすると接着した肝細胞は伸展形態を示し、DNA合成能の指標である[^3H]-チミジンの取り込みが亢進し、逆にコーティング濃度を高めると接着形態は球状化し、その変化に伴い[^3H]-チミジンの取り込みが顕著に抑制された。さらに、分化機能の指標である胆汁酸形成分泌能は、PVLAのコーティング濃度を高めて球状接着形態をとらせると[^3H]-チミジンの取り込みに相反して上昇する傾向を示した。アシアロ糖タンパク質モデルとして設計されたPVLAが、コーティングする際の溶液濃度によって異なる細胞応答のメカニズムを解明するために濃度の違いによるPVLAの吸着状態の変化をいくつかの表面解析法により検討した。原子間力顕微鏡(AFM)によって濃度依存的なPVLAの吸着状態の変化が観察された。高分解能走査電顕像もあわせて解釈すると高濃度のPVLA水溶液からコートした場合に比べ、低濃度水溶液からのコートでは吸着状態がドメイン状(パッチ状)であり、ガラクトース密度の分布がxy平面内のみならず、垂直方向にも不均一になっているものと推定された。低濃度系ではPVLA培養シャーレ表面でミセル状態からunfoldした状態で吸着したものも相対的に多いと考えられる。すなわち、PVLAの培養シャーレ表面への吸着状態の変化、つまり界面近傍におけるβ-ガラストースのドメイン的な不均一分布を肝細胞が認識して応答性を変えたものと考えられた。

I am a matrix material (extracellular matrix material) that is necessary for the growth of liver cells and the proliferation of cultured hepatocytes. Differentiation function appears and the control is controlled. Then the cells are placed on the matrix PVLA and the cells are separated and the cells are separated.その Results, アシアロsugar タンパクquality を単pure モデル化したartificial matrix material PVLAを开発した. Xingwei deep PVLA aqueous solution (polymer ミセル) concentration を変化させることで, culture Liver cells undergo changes in morphology, proliferative capacity, and differentiation function, which are the opposite of changes in liver cells. The concentration of PVLA is low and the stretched shape of liver cells is shown, and the DNA synthesis energy is an indicator [^3H]-チミジンの取り込みが Hyperactivity し、Reverse にコーティングConcentration をHigh めるとThen the form はSpheroidization し、その変化に合い[^3H]-チミジンのtake り込みが顕敫综合された.さらに、Indicator of differentiation function であるBile acid formation and secretion ability は、PVLA のコーティングconcentration を高めてball Shape then form をとらせると[^3H]-チミジンのtake り込みに opposite して rise する tendency をshow した.アシアロsugar タンパクquality モデルとして design されたPVLAが、コーティングするinterior solution concentration によってdifferent なる cell answerのメカニズムを Explain the concentration of PVLA and the adsorption state of PVLA. Interatomic force microscopy (AFM) is used to detect concentration-dependent changes in the adsorption state of PVLA. Highly resolving power can be used to detect electrochemical images, such as high-concentration PVLA aqueous solution and low-concentration aqueous solution, and adsorption state of low-concentration aqueous solutionドメイン (パッチshaped) であり、ガラクトース density distribution がxy plane It is estimated that the vertical direction is not uniform, and the vertical direction is not uniform. The low-concentration system of PVLA culture is used for the surface of the PVLA surface and the unfolded state of the PVLA.すなわち, PVLA culture シャーレ surface への adsorption state の変 change, つまり interface close to におけるβ-ガThe non-uniform distribution of ラストースのドメインをHepatocytesがKnowledge of the nature of して応を変えたものと考えられた.