テーラーメイド治療への応用をめざすヒトiPS細胞の標準化培養器材の開発

开发人类 iPS 细胞标准化培养设备，旨在将其应用于定制治疗

• 批准号: 23240067
• 负责人: 赤池 敏宏
• 金额: $ 13.31万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-23240067/
• 关键词: iPS細胞; E-カドヘリン; 再生医療; 組織工学; ES細胞

ヒトiPS細胞を用いた再生医療の実現には,iPS細胞の安全性や様々な組織への分化制御も重要であるが,ヒトからの迅速なiPS細胞の樹立も課題の一つである.現在の樹立法では遺伝子導入後,ディッシュ上のiPS細胞の出現を観察して樹立している.このため,一つのディッシュのどこにどのくらい出現するかはわからないのが現状である.そこで,E-cad-Fcを利用したiPS細胞の効率的な樹立を実現する.線維芽細胞からiPS細胞を樹立する場合,線維芽細胞集団の中にiPS細胞が出現するようになる.線維芽細胞集団は,通常E-カドヘリンを発現していないがiPS化した線維芽細胞はE-カドヘリンを発現するようになる.そこで,遺伝子導入を行った線維芽細胞をE-カドヘリン-Fc上に培養して,E-カドヘリンを発現するiPS細胞のみをいち早く効率的に採取し,フィーダーフリーの培養系に移して増殖させていく.これによって迅速且つ効率的なiPS細胞の樹立を成功させる.本年度では,ヒトiPS細胞の迅速な樹立法を検討するための条件検討として,マウスiPS細胞の樹立の迅速法について検討を行った.マウス繊維芽細胞にpiggyBAC法を用いて,Oct3/4,sox7,klf4,c-Mycの遺伝子導入を行い,マウス繊維芽細胞のiPS化に成功した.そして,マウスiPS細胞のE-カドヘリン-Fcコート培養皿に対する接着を検討した.その結果,新たに作製したマウスiPS細胞は未分化性を維持しており,E-カドヘリン-Fcコート培養皿に対する接着性が高いことが見出された.

The safety of iPS cells and the control of tissue differentiation are important issues in the development of regenerative medicine. After the introduction of the gene, the emergence of iPS cells on the screen was observed. This is the first time I've seen this. E-cad-Fc is used to establish the efficiency of iPS cells. When a line of cells or iPS cells is established, iPS cells appear in a line of cells or a collection of cells. The line bud cell group usually develops E-receptors but iPS-converted line bud cells develop E-receptors. In this case, the vector was introduced into the culture system of iPS cells on the E-cell-Fc, and the E-cell-Fc was developed into the culture system of iPS cells. The rapid and efficient establishment of iPS cells has been successful. This year, the conditions for rapid establishment of iPS cells were discussed, and rapid establishment of iPS cells was discussed. The piggyBAC method was successfully used to transform the iPS of the cell line into the cell line. Oct3/4, sox7, klf4,c-Myc were introduced into the cell line. The E-cell culture of iPS cells was then discussed. As a result, the new system was developed and iPS cells maintained their undifferentiated nature.