神経毒のニューロン死機構:アポトーシスの関与と新規神経由来因子の防御作用

神经毒性神经元死亡机制：细胞凋亡的参与和新型神经元衍生因子的保护作用

• 批准号: 06272203
• 负责人: 野村 靖幸
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06272203/
• 关键词: ニューロン死; 神経毒; 細胞内機構; アポトーシス; NO; LPS

培養C6グリオーマ細胞において、エンドトキシン(LPS)とインターフェロンγ(IFN-γ)を同時刺激することによって誘導型NO合成酵素(iNOS)が発現することを見い出した。その詳細な情報伝達機構を解析するため種々検討した。この二つの薬物によるiNOSの誘導はチロシンキナーゼ阻害薬であるハービマイシンAで抑制されたことから、蛋白質リン酸化が必要であることがわかった。IFN-γはJAK2キナーゼの自己リン酸化(チロシン残基)を引き起こしたが、このリン酸化はハービマイシンAによって抑制されなかった。一方、LPSは核内転写因子のNF-kBの活性化を引き起こした。この活性化はiNOS誘導を抑制する濃度のハービマイシンAで抑制された。また、LPS刺激は低分子量GTP結合蛋白質のRasを不活性型(GDP型)から活性型(GTP型)にさせた。さらに、この活性化に伴うmitogen-activated protein kinase(MAPK)の活性化をも引き起こした。この活性化にもチロシンキナーゼが関与していることから、このカスケードも酵素誘導に関与している可能性が示唆された。次に、NOドナー(sodium nitroprusside(SNP),S-nitroso-N-acetylpenicillamine (SNAP))をニューロンモデル細胞(PC12細胞やNG108-15細胞)に作用させると、細胞死の指標の一つである乳酸デヒドロゲナーゼ(LDH)の漏出がおこった。さらには、NG108-15細胞では同時にDNAの断片化も見られた。このことから、NOは細胞死を引き起こすことがわかった。SNPはglyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase(GAPDH)とNADとの反応(GAPDHの修飾)を亢進させ、活性の低下をも引き起こした。このGAPDHの阻害薬であるkoningic acidをNG108-15細胞に作用させるとLDH漏出が起こったことから、NOによる細胞死のメカニズムの一つにGAPDHが関与することが示唆された。

It has been demonstrated that inducible NO synthase (iNOS) can be produced when C6 cells are cultured and stimulated simultaneously with Endostatin (LPS) and IFN-γ(IFN-γ). Detailed information about the organization analysis The two substances are induced by iNOS, and the inhibition of iNOS is necessary. IFN-γ-α-γ- The activation of NF-kB, a nuclear transcription factor, was induced by LPS. The activity of iNOS is inhibited by the concentration of iNOS. LPS stimulates the development of Ras inactive (GDP-type) and active (GTP-type) low molecular weight GTP binding proteins. The activation of mitogen-activated protein kinase(MAPK) is accompanied by the activation of mitogen-activated protein kinase(MAPK). The possibility of enzyme induction is demonstrated. NO (sodium nitroprusside(SNP),S-nitroso-N-acetylpenicillin (SNAP)) plays an important role in cell death (PC12 cells and NG108 -15 cells). In addition, NG108-15 cells were isolated and DNA fragments were detected simultaneously. No, NO, no. SNP glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase(GAPDH) and NAD are both active and inactive. The GAPDH inhibitor is a koningic acid that acts on NG108 -15 cells, causing LDH leakage and NO leakage.

项目成果

野村靖幸: "最新医学からのアプローチ 13 NO" グリアでのNO産生とニューロン死(印刷中), (1995)

Yasuyuki Nomura：“最新医学 13 NO 的方法”神经胶质细胞中 NO 的产生和神经元死亡（出版中），（1995 年）

Takashi Uehara: "Possible involvement of protein kinase C and low molecular weight GTP-binding proteins in thrombin-induced histamine secretion in human" Biochemical and Biophysical Research Communications. 206. 492-496 (1994)

Takashi Uehara：“蛋白激酶 C 和低分子量 GTP 结合蛋白可能参与凝血酶诱导的人类组胺分泌”生物化学和生物物理研究通讯。

北村佳久: "NOシンターゼ" 「脳特異的蛋白質、接着蛋白質」蛋白質化学. (印刷中). (1995)

Yoshihisa Kitamura：“NO合酶”“脑特异性蛋白，粘附蛋白”蛋白质化学（出版中）。