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細胞骨格機能制御解析による神経可塑性の研究

通过分析细胞骨架功能调节研究神经可塑性

基本信息

批准号：
07278224
负责人：
乾誠
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07278224/
关键词：
シナプス後肥厚部テンシンリン酸化チロシン

项目摘要

シナプス後部にはシナプス後肥厚部(PSD)と呼ばれる特殊な構造が存在し、化学伝達物質物質受容体の集合、神経細胞間の接合、受容体感受性の制御などの機能に密接に関与していると考えられている。しかしながら、PSDの分子レベルでの構造、機能に関する解析は未だほとんど成されていない。本研究は、PSDの分子構築を明らかにし、機能蛋白質の同定及びPSD蛋白質間の相互作用の解析からシナプス機能を解明し、神経回路網形成における役割を明らかにすることを目的とする。ラット脳より調製したPSD分画には、約180kDaと110kDaの2つの主要なチロシンリン酸化蛋白質が存在する。これらのリン酸化を中心にいわゆる細胞接着部の細胞骨格系蛋白質がPSDの形成及び機能に重要な役割を果たしているのではないかという仮説のもとに、SH2ドメインを含む蛋白質、チロシンリン酸化蛋白質、アクチン関連細胞骨格蛋白質の検察を特異抗体を用いて行った。この際、PSD精製中に得られる各細胞下分画とPSD分画との比較からPSDへの局在を検討した。PSD分画には、カルスペクチンとCaMキナーゼIIの集積がみられ、、抗チロシンリン酸化抗体で染まる180kDaの蛋白質(NMDAレセプター2)も濃縮されている。このようなPSD分画を含めた各分画を用いてイムノブロットを行った結果、テンシン、α-アクチニンが著明にPSD分画に集積されていた。これに対し、src、パキシリン、ビンキュリン、FAKなどは、PSD分画に集積されていなかった。テンシンは、PSD分画を用いた金コロイド法による免疫電顕によってPSD構成員であることが示された。また、脳の発達に伴うテンシン発現量の変化を抗テンシン抗体を用いて調べた結果、ラット前脳の湿重量あたりのテンシン含量は、生後1週から2週にかけて著明に増加し、3週以降はほぼ一定であることが示された。すなわち、テンシンの発現は、シナプス形成時期に一致して著明に増加していた。以上の結果は、アクチン結合蛋白質であるテンシンが神経シナプスのPSDの構成蛋白質であることを示している。また、テンシンはアクチンフィラメントを同部位に固定する役割を担うと考えられる。しかしながら、パキシリン、ビンキュリン、FAKなどと局在を異にすることから、PSDにおけるテンシンは他の細胞接着部位でのテンシンの存在様式とは全く異なった形で存在すると考えられる。現在、PSDにおけるテンシンの結合蛋白質、存在様式の解析を精力的に進めている。

The posterior hypertrophic portion (PSD) of the brain is characterized by the existence of special structures, the aggregation of chemical receptors, the junction between brain cells, and the control of receptor receptivity. The molecular structure and function of PSD are analyzed in detail. This study aims to clarify the molecular architecture of PSD, the identity of functional proteins, and the analysis of interactions between PSD proteins. The main acidified protein in the PSD spectrum is about 180kDa and 110kDa. In addition, it is important for the formation and function of PSD to detect the expression of cytoskeletal proteins in the cell interface, such as cytoskeletal proteins, cytoskeletal proteins and cytoskeletal proteins. In this case, PSD refinement is carried out under the conditions of each cell and PSD separation is carried out under the conditions of comparison. PSD analysis of protein, protein and CaM II concentration, anti-protein and anti-NMDA protein concentration of 180kDa protein The PSD is divided into two parts: the first part is divided into three parts: the second part is divided into three parts: the third part is divided into three parts: the fourth part is divided into four parts: the fourth part is divided into three parts: the fourth part is divided into four parts For example, src, file, FAK, PSD, etc. The first step is to establish a new system of communication between the two countries. In addition, the changes in the amount of anti-virus antibodies used in the development process, the wet weight before birth and the content of anti-virus antibodies increased from 1 week to 2 weeks after birth, and decreased from 3 weeks to 3 weeks. The development of the disease is consistent with the development of the disease. The above results show that the protein binding protein is the constituent protein of PSD. The same part of the body is fixed. For example, if a cell is connected to another cell, the cell is connected to another cell, and the cell is connected to another cell, the cell is connected to another cell. Now, PSD is the key to the development of binding protein and expression analysis.