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網膜視蓋投射形成の分子機構

视网膜顶盖突起形成的分子机制

基本信息

批准号：
07279204
负责人：
仲村春和
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07279204/
关键词：
ニワトリ脳視蓋 engrciled pax-5 レトロウイルス網膜視蓋投射

项目摘要

視蓋の吻尾極性の形成にはengrailed(en)遺伝子が重要な働きをしていることが、我々の研究により明らかにされている。本研究ではenを中心とする遺伝子発現制御のカスケードを明らかにする目的で中脳胞(視蓋原基)の吻側、尾側それぞれのcDNAライブラリーを作製し、サブトラクション法によりそれぞれで特異的な発現する遺伝子をクローニングし、レトロウイルスベクターを用いた強制発現法によりen遺伝子との関係を追究した。サブトラクションにより、中脳後脳境界部で発現している遺伝子としてpax-5がクローニングされた。pax-5遺伝子は孵卵2日目(E2)で10体節期頃には中脳後脳境界部に発現しており、E4では中脳後脳境界部で強く、前の方に向かうに従って弱いという勾配を持って発現している。en-2の発現と重なるような発現パターンであるが、発現の開始はen-2の方がちょっと早い。pax-5はショウジョウバエのペアルール遺伝子pairedと相同な遺伝子であり、ショウジョウバエでのヒエラルキーではenよりも上位にあると思われる。そこでpax-5をRCASレトロウイスルベクターに組み込み強制発現させて、enの発現パターンを調べてみた。pax-5を強制発現させた後、en-2の発現を抗en抗体による免疫染色で、pax-5の発現をin situハイブリダイゼイションで検出した。おもにwhole mountによる染色を行った。レトロウイルスによる強制発現により視蓋原基の前の方でもパッチ状に強く発現しているところが見られた。pax-5を異所的に強制発現させられた一部の細胞でenの異所的な発現が見られた。enの異所的発現は間脳の背側の一部の細胞で見られた。ここではいくつかの細胞がpax-5,en-2両遺伝子ともに発現していた。この実験結果はpax-5はen-2を発現させるよう促進的に働く因子であることを示している。ただし、pax-5を発現したすべての細胞がen-2を発現したわけではないのでen-2の発現にはpax-5とさらに別の制御因子が働く必要があることを示唆している。

The formation of the tail polarity of the visual cover is entangled (en) in the study of the important factors. In this study, we investigated the relationship between gene expression and stress expression in the rostral and caudal regions of the middle cell (optic motif) in order to control gene expression in the middle cell (optic motif). In the middle of the border, the number of children and pax-5 was increased. Pax-5 is the first to hatch on the 2nd day (E2) and the 10th body segment is the second to hatch on the 2nd day (E4), and the third to hatch on the 2nd day (E4). The occurrence of en-2 is heavy, the occurrence of en-2 is heavy, and the occurrence of en-2 is heavy. Pax-5 is the same as Pax-5, which is the same as Pax-5, which is the same as Pax-5. RCAS-5 is the most important part of the system. After pax-5 stress was detected, en-2 was detected and anti-en antibody was detected by immunostaining, pax-5 was detected in situ. The whole mount was painted. In the first place, the basic elements of the visual system are exposed to stress. The stress of pax-5 in some cells has been detected. A part of the cells on the back of the cell are visible. The cells of pax-5,en-2 are the same as the cells of pax-5,en-2. The result is pax-5, en-2, and promotion factors. The expression of pax-5 in the cell is necessary for the expression of pax-5 in the cell