生殖細胞における染色体テロメアの機能構造の解析

生殖细胞染色体端粒功能结构分析

• 批准号: 07283210
• 负责人: 石川 冬木
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07283210/
• 关键词: テロメレース; 蛋白質精製

生殖細胞のような不死化細胞において、このような通常のDNA合成機構のみでは染色体DNA末端が短小化することに拮抗する機構として、現在多くの支持を集めているのがテトラヒメナにおいて初めて同定されたテロメレースである。テロメレースはテロメアDNAを構成する単純繰り返し配列をその末端に新規に合成付加する作用を持ち、内在するRNAを鋳型とする一種の逆転写酵素と考えられている。しかし、現在、生殖細胞特異的にテロメレースが発現している分子機構はもちろんのこと、生殖細胞系列がmitosisとmeiosisを繰り返して維持されているどの段階の細胞において活性があるのかすら不明なままであるのが現状である。そこで、本研究においては、ヒトテロメレースの検出系の開発と酵素の精製を試み、以下の様な結果を得た。ヒトテロメレースは、きわめて微量にしか存在しないために、その生化学的な研究のためには高感度かつ定量性に富むテロメレースの検出系の開発が不可欠であった。我々は、テロメレースの産物であるテロメア繰り返し配列をPCRを用いて高感度に検出することで、高感度かつ定量性よくテロメレース活性を測定する系(Stretch PCR assay)の開発に成功した。この系を用いて、これまで純化精製の報告のないヒトテロメレースの精製を試み、テロメレースの蛋白質成分と思われる数種類の蛋白質を同定した。現在、この蛋白質の構造解析を行っている。今後、この蛋白質をコードしている遺伝子をクローニングすることにより、テロメレースが生殖細胞では、活性が強く、体細胞では低い分子機構の解明を進めたい。

The reproductive cycle is not dead. The DNA synthesis machine usually uses the chromosome DNA terminal shortening device to antagonize the reproductive system. Now, the multiplex support system is used to control the cell death rate. The cell cycle is the same as that of the control. The purpose of this paper is to determine the effect of DNA on the performance of end-to-end synthesis of new regulations, the effect of synthesis, and the internal effect of RNA, a reverse writing enzyme. The molecular mechanism of the reproductive cycle, the molecular mechanism of the reproductive cell, and the series of the mitosis cell, the reproductive cell series, are used to maintain the activity of the cell, the cell, the cell. In this study, the results of this study were successful. The results of the following experiments were successful. In this paper, the results show that there is a high degree of sensitivity in the study of biochemistry and biochemistry. the results show that there is a high degree of sensitivity, high sensitivity, high sensitivity, We do not need to use the PCR system to determine the activity of the system (Stretch PCR assay) with high sensitivity and high sensitivity. In the system, you need to use information, information, etc. At present, the protein is analyzed and analyzed. In the future, the protein should be used to determine the molecular weight of the reproductive cells, the strength of the activity and the molecular mechanism of the low molecular weight.

项目成果

Kajita, Y. , Kobatake, E. , Ishikawa, F. , and Aizawa, M.: "Bioluminescent detection of RNA with sequence-specificity using RNA binding proteinluciferase fusion protein" J. Biotechnol.43. 63-70 (1995)

Kajita, Y.、Kobatake, E.、Ishikawa, F. 和 Aizawa, M.：“使用 RNA 结合蛋白荧光素酶融合蛋白对具有序列特异性的 RNA 进行生物发光检测”J. Biotechnol.43。

Kajita, Y., Nakayama, J., Aizawa, M., and Ishakawa, F: "The UUAG-specific RNA binding protein, hnRNP D0 : Common modular structure and binding properties of 2xRBD-Gly family" J. Biol. Chem.270. 22167-22176 (1995)

Kajita, Y.、Nakayama, J.、Aizawa, M. 和 Ishakawa, F：“UUAG 特异性 RNA 结合蛋白 hnRNP D0：2xRBD-Gly 家族的常见模块结构和结合特性”J. Biol。