エンジイン系人工DNA制限酵素の分子設計と機能発現制御技術の開発

基于烯二炔的人工DNA限制性内切酶的分子设计及功能表达控制技术的开发

• 批准号: 08219236
• 负责人: 戸嶋 一敦
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08219236/
• 关键词: DNA切断; エンジイン; 人工制限酵素; 分子設計; ヘテロ原子

エンジイン系人工DNA制限酵素の分子設計と機能発現制御技術の開発研究の一環として、既に、環内に硫黄原子を有する10員環エンジインスルフィドを合成し、これが、温和な弱塩基性条件下、高いDNA切断活性を有し、かつプリン塩基選択的にDNAを切断することを明らかにした。今年度は、硫黄の代わりに窒素および酸素原子を有する新規ヘテロエンジイン化合物を合成し、それらのDNA切断活性を比較、検討した。まず、10員環エンジイン骨格内に窒素原子を有し、DNA塩基配列認識部位の導入のための水酸基を有するアザエンジイン1aおよび10員環エンジイン骨格内に酸素原子を有し、DNA塩基配列認識部位の導入のための水酸基を有するオキサエンジイン2aを、それぞれ効果的な分子間および分子内環化反応を鍵反応として合成した。さらに、1aおよび2aのアリル位の水酸基に、DNAとの親和力を高めるために、ベンゾイル基、2-キノキザロイル基、1-ナフトイル基および2-ヒドロキシ-1-ナフトイル基の各種芳香環をエステル化により、それぞれ導入したアシル誘導体1b〜eおよび2b〜eを合成した。次に、これらのDNA切断活性を評価した結果、オキサエンジイン2b〜eのDNA切断活性は、相当するエンジインスルフィド誘導体より劣るのに対し、アザエンジイン1b〜eは、弱塩基性条件下、同程度のDNA切断活性を示すことを明らかにした。また、1b〜eは、酸性条件下において、より高いDNA切断活性を有すること、また、濃度依存的にDNAの二本鎖切断が起こることが明らかになり、エンジインスルフィドには見られなかった新たなDNA切断機能を有していることを見い出した。さらに、そのDNA切断活性力は、アリル位の水酸基に導入した芳香族化合物の種類に依存し、1-ナフトイル基を有するオキサエンジイン1dが、最も高いDNA切断活性を示すことが明らかになった。

In this system, the artificial DNA restriction enzyme molecular design machine can be used to study the control technology. In the first place, 10% sulfur atoms in the environment are available. Under mild and weak basic conditions, high-level DNA cut-off activity is available, and the selected DNA cut-off system is sensitive. This year, sulfur substituted asphyxiate, asphyxiate, acid atoms, new regulations, synthesis of compounds, DNA cutting activity, and so on. In the bone lattice, the asphyxiant atom was found in the bone lattice, the asphyxiant atom was found in the bone lattice, and the DNA acid group was found in the bone lattice. the acid group was found in the bone lattice, while the acid atom in the bone lattice was detected in the bone lattice, and the acid atom in the bone lattice was found in the bone lattice, and the acid group in the DNA was found in the bone lattice. Intermolecular cyclization, intramolecular cyclization, anti-enzymatic synthesis, anti-enzymatic synthesis. The synthesis of various kinds of aromatic compounds, such as acid acid base, DNA base, 2-chain base, 1-ring base, 2-chain base, 1-chain base, and so on, were synthesized by the synthesis of various kinds of aromatic compounds, such as acid acid, DNA, amino acid, DNA, DNA, The results of DNA cut activity test, 2b~e cut activity test, 1b~e cut activity test, DNA cut activity test showed that the same degree of DNA cutting activity showed the same level of DNA cutting activity. The activity of DNA cutting under acid condition, 1b~e, acid condition is different from that of the ordinary university of DNA, which is dependent on the degree of acidity. the new DNA cutting machine can be used to cut the temperature. The cleavage activity of DNA, the acid group of water in the first place, the dependence of aromatic compounds, the activity of DNA cleavage and the highest activity of DNA cleavage show that the acid group of water is sensitive to the activity of aromatic compounds.

项目成果

戸嶋一敦: "エンジイン系人工DNA切断分子の設計と合成" 有機合成化学協会誌. 54・6. 503-513 (1996)

Kazutoshi Toshima：“基于烯二炔的人工 DNA 切割分子的设计和合成”有机合成化学学会杂志 54・6（1996）。