チトクロムbc型NOリダクターゼによるNOの変換機構

细胞色素bc型NO还原酶转化NO的机制

• 批准号: 08249214
• 负责人: 櫻井 武
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Okazaki National Research Institutes
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08249214/
• 关键词: NO; NOリダクターゼ; チトクロム; ESR; MCD; 膜タンパク; コンプレックス; レドックス

Al cali genes xylosoxi dans GIFU 1051 を嫌気条件で培養し、膜成分をドデシルマルトシドで処理することによって、可溶化したのち、DEAEセルロース、ヒドロキシアパタイト、セファデックスなどを用いたカラムクロマトを行うことによって、NOリダクターゼを単離した。酵素活性の検出はガスクロを用いる方法を開発して、酵素精製を行った。次いで、吸収、MCD、ESRスペクトルなどを測定することによって、NOリダクターゼをキャラクタライズした。その結果、この酵素はチトクロムbサブユニットとチトクロムcサブユニットのコンプレックスであることがわかった。さらに、ヘムの電子状態として、高スピンと低スピンの成分があることを明らかにした。ついで、NOリダクターゼのレドックスカップルであると考えられる、可溶性タンパク、チトクロムc553を単離して、吸収、MCD、ESRスペクトルなどによって、ヘムの電子状態について詳しく検討した。このような研究によりAl cali genes xylosoxidans GIFU 1051 にNOリダクターゼが存在することを確認し、基本的なキャラクタリゼーションを行ったが、この酵素が著しく不安定であるので、より詳細な研究を進めるために、大量に安定な酵素を得ることをめざして、様々の脱窒菌をスクリーニングテストした。その結果、Par acoccus hal odenifitricansが最適であることを突き止め、精製法を確立した。また、Al cali genes xylosoxi dans GIFU 1051 と同じレベルの分光学的キャラクタリゼーションを行った。現在、ゲノムクローニングを目指して、ペプチドシーケンスを部分的に調べているところである。

Alcali genes xosoxi dans GIFU 1051 is a member of the group of The enzyme activity is detected by the method of enzyme purification. For example, if you want to use a computer, you can use it to test your computer. If you want to use a computer, you can use it.その结果、この酵素はチトクロムbサブユニットとチトクロムcサブユニットのコンプレックスであることがわかった。The electronic state of the system is high and low, and the electronic state of the system is high and low. In the middle, NO, NO, This study was carried out to confirm the existence of NO in the GIFU 1051 of Al cali genes, to conduct basic research on NO in the GIFU 1051, to conduct detailed research on NO in the GIFU 1051 of Al cali genes and to conduct detailed research on NO in the GIFU 1051 of Al cali genes. Par acoccus hal odenifricans is the most suitable, refined method is established Alcali genes xylosoxi dans GIFU 1051 and the same spectroscopy were used. Now, you can choose from a variety of options.

项目成果

櫻井武 他3名: "Reduction and Oxidation Processes of Blue Copper Proteins,Azurin,Pseudoazurin,Umecyanin,Stellacyanin,Plantacyanin,and Plastocyanin Approached by Cyclic and Potential Step Voltammetries" Bulletin of the Chemical Society of Japan. 69・10. 2855-2862

Takeshi Sakurai 和其他 3 人：“通过循环和电位阶跃伏安法实现蓝铜蛋白、天青蛋白、假天青蛋白、Umecyanin、Stellacyanin、Plantacyin 和质体蓝蛋白的还原和氧化过程”，日本化学会通报 69・10。 2862

櫻井武 他2名: "FT-IR Spectra of the Azide-Type 3 Copper in Laccase and Ascorbate Oxidase" Chemistry Letters. 1996・6. 651-652 (1996)

Takeshi Sakurai 和另外 2 人：“漆酶和抗坏血酸氧化酶中叠氮化物 3 型铜的 FT-IR 光谱”，化学快报 1996・6（1996）。

櫻井武: "Cyclic Voltammetry of Cucumber Ascorbate Oxidase" Chemistry Letters. 1994・4. 481-482 (1996)

樱井武：“黄瓜抗坏血酸氧化酶的循环伏安法”化学快报 1994・4（1996）。