ゼブラフィッシュ中枢神経系構築機構の分子生物学

斑马鱼中枢神经系统构建机制的分子生物学

• 批准号: 08254218
• 负责人: 岡本 仁
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08254218/
• 关键词: LIM; ホメオドメイン型転写因子; Islet-3; ゼブラフィッシュ; 小脳形成機構; pax2; wntl; 中脳後脳境界部

LIM/homeodomain型転写因子のLIM domainは、通常homedomainのターゲットDNAへの結合を阻害しているが、特定の共役因子がこの部位に結合することにより阻害が解除され、homeodomainのターゲットDNAへの結合が可能となる、というモデルが提唱されている。我々はこのモデルに従い、眼と視蓋に特異的に発現するIslet-3のLIM領域のみをゼブラフイッシュ胚で過剰発現させ、共役因子を吸収することによって内因性Islet-3の機能を抑制する実験を行った。LIM過剰発現胚では、眼胞の欠失がみられた。正常発生過程で、中脳及び中脳・後脳境界の背側組織(翼板)は、発生過程でダイナミックな変形を示し、各々視蓋と小脳の原基へと分化する。LIM過剰発現胚では、この過程が阻害されており、視蓋及び小脳への区分化が起こらない。更に、本来小脳原基へと分化するはずの中脳・後脳境界部では、発生過程で細胞死が観られ、結果的に小脳原基が著明に低形成となった。正常胚では、wntl,eng2及びpax2などの遺伝子は、中脳及び中脳・後脳境界領域の分化を促進していることが分かっている。LIM過剰発現胚では、これらの遺伝子は受精後10時間目以後に正常胚と同じようにすべて発現するが、14時間目頃にまずwntlの発現が消失し、その後にeng2とpax2の発現も失われることが分かった。このことと、モザイク解析の結果などから、中脳及び中脳・後脳境界領域の分化においてIslet-3は、中脳・後脳境界部から放出される中脳分化促進因子(FGF8)に反応し、中脳がwntlを分泌する過程の維持に必須であること、さらにはwntlによって誘導される中脳起源の分泌因子(未同定)を介して、小脳原基の分化にも深く関わっていると考えらえる。

The LIM domain of LIM/homedomain-type transcription factors blocks the binding of homedomain DNA in general, blocks the binding of homedomain DNA in specific transcription factors in this site, blocks the binding of homedomain DNA in general, and blocks the binding of homedomain DNA in particular. We have a unique discovery of Islet-3 in the LIM domain, and a common service factor that inhibits the function of Islet-3. LIM has been found in the embryo, eye cells and lack of heart. The dorsal tissue (wing plate) of the normal development process, middle and rear regions, and the development process, the development process. The process of LIM's development is blocked by the differentiation of the region between the two regions. In addition, the differentiation of the original small primordia is not only in the middle of the cell, but also in the later part of the cell. The development process is in the process of cell death, and the result of the small primordia is in the lower part of the cell. Normal embryo, wntl,eng2 and pax2 are the descendants of the original, middle and late stages of the differentiation of the realm. LIM over-detected embryos were found in normal embryos 10 hours after fertilization, and the same gene was found in normal embryos 14 hours after fertilization. The detection of wntl disappeared, and the detection of eng2 and pax2 disappeared later. The results of this analysis are: The differentiation of the middle, middle, and rear boundary domains is mediated by Islet-3, the middle differentiation promoting factor (FGF8), which is released from the middle, middle, and rear boundary domains. The secretion of wntl is necessary for the maintenance of the secretion process of wntl. The differentiation of small primordia is deeply related to the study of small primordia.

项目成果

Kikuchi Y: "Ocular and cerebellar defects in zebrafish induced by overexpression of the LIM domain of the Ilet-3 LIM/homeodomain protein." Neuron. (in press). (1997)

Kikuchi Y：“Ilet-3 LIM/同源域蛋白的 LIM 结构域过度表达引起斑马鱼的眼部和小脑缺陷。”

Shimoda N: "Mermaid : a family of short interspersed repetitive elements widespread in vertebrates." Biochem Biophys Res Commun. 220. 226-232 (1996)

Shimoda N：“美人鱼：脊椎动物中广泛存在的短散布重复元素家族。”

Okamoto H: "Basic Neuroscience in Invertebrate" Business Center for Academic Societies Japan, 367 (1996)

冈本 H：“无脊椎动物的基础神经科学”日本学术团体商业中心，367（1996）

Kim C-H: "Neuron-specific expression of a chicken gicerin cDNA in transient transgenic zebrafish." Neurochem Res. 22. 231-237 (1996)

Kim C-H：“鸡甘油 cDNA 在瞬时转基因斑马鱼中的神经元特异性表达。”

Shimoda N: "Mermaid,a family of short interspersed repetitive element,is useful for the zebrafish genome mapping." Biochem Biophys Res Commun. 220. 233-237 (1996)

Shimoda N：“Mermaid 是一个短散布重复元件家族，对于斑马鱼基因组作图很有用。”