中脳・小脳形成における組織間相互作用とIslet-3

中脑和小脑形成中的组织间相互作用和 Islet-3

• 批准号: 10171240
• 负责人: 岡本 仁
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10171240/
• 关键词: ゼブラフィッシュ; ホメオドメイン蛋白; Islet-3; 中脳分化; 中脳後脳境界部; サブトラクション; ディファレンシャルディスプレー; 小脳分化

1:サブトラクション法による中脳および中脳後脳境界部形成因子の探索正常胚及びLIM過剰発現胚の頭部(中脳後脳境界部及びそれより前方部)よりRNAを調製し、cDNAのサブトラクションを行った。サブトラクションで得られた約2000クローンについてデイファレンシャルハイブリダイゼーションを行い、目や視蓋原基、中脳後脳境界部などに特異的に発現しているクローンを10個得た。この内で視蓋原基や中脳後脳境界部に発現するものは3クローン得られた。一つは317アミノ酸からなるタンパク質をコードする新規遺伝子である(クローン#533)。Islet-3のLIMドメインを過剰発現することによって、中脳後脳境界部の形成に必要な遺伝子pax2、eng2、wntlの発現が受精後約14時間目あたりから減少し始めることが知られている。クローン#533はLIM過剰発現胚の中脳後脳境界部では受精後14時間目で既に発現がみられない。これらのことからクローン#533はIsIet-3によるpax2、eng2、Wmlの発現調節に深く関与する分子である可能性がある。2:Differential Disρlay法による検索我々は現在、サブトラクションに相補的な方法としてDifferentialDisplay法を用いて、Isle-3の下流因子を検索している。正常胚とIslet-3のLIM領域を過剰発現する胚の、中脳および中脳後脳境界部から単離したtotalRNAを出発材料として、DiffcrcntialDisplay法によって合計約26,000本のバンドを比較したところ、172本のバンドが、LIM過剰発現胚において現弱しており、124本のバンドが増強していた。現在これらのバンドを単離し、各々に対応するmRNAの発現パターンを解析中である。

1. The study of RNA modulation and cDNA modulation in the head of normal embryo and LIM embryo (middle and rear boundary and front boundary). There are about 2000 krones in the box, including 10 krones, which are specially discovered in the original base and the middle and rear parts of the box. The inner part of the visual cover is the middle part and the rear part of the visual cover is the middle part. A new regulation on the quality of a product (#533). Islet-3's LIM gene was detected at about 14 hours after fertilization. LIM No. 533: The embryo appears in the middle of the post-fertilization stage, and the embryo appears in the post-fertilization stage 14. The possibility of the expression regulation of Pax2, Eng2, Wml in Islet-3 is discussed. 2:Differential Display method is used to detect the presence of the factor, the presence of the factor, and the presence of the factor. The normal embryo and the LIM domain of Islet-3 were found to be weak in the embryo, middle and rear boundary parts, and the total RNA was found to be weak in the embryo, middle and rear boundary parts. The total RNA was found to be weak in the embryo, middle and rear boundary parts, and the total RNA was found to be weak in the embryo, middle and rear boundary parts. The total RNA was found to be weak in the embryo, middle and rear boundary parts, and the total RNA was found to be weak in the embryo, middle and rear boundary parts. Now, the expression of mRNA in different parts of the genome is analyzed.

项目成果

Kikuchi, Y., Segawa, H., Tokumoto, M., Hotta, Y., Uyemura, K., and Okamoto, H.: "Islet-3 in the regional specification of the brain." pp108-114 in Neural Development Uyemura, K., Kawamura, K., Yazaki, T., eds., Springer.108-114 (1998)

Kikuchi, Y.、Sekawa, H.、Tokumoto, M.、Hotta, Y.、Uyemura, K. 和 Okamoto, H.：“大脑区域规范中的 Islet-3”。

Higashijima,S.,Nose,A.,Eguchi,G.,Hotta,Y.,and Okamoto,H.: "Mindin/F-spondin family : novel ECM proteins expressed in the zebrafish embryonic axis." Developmental Biology. 192. 211-227 (1997)

Higashijima,S.、Nose,A.、Eguchi,G.、Hotta,Y. 和 Okamoto,H.：“Mindin/F-spondin 家族：在斑马鱼胚胎轴中表达的新型 ECM 蛋白。”

Higashijima, S., Okamoto, H., Ueno, N., Hotta, Y., and Eguchi, G.: "High-frequency generation of transgenic zebrafish which reliably express GFP in whole muscles or the whole body by using prooter of zebrafish origin." Developmental Biology. 192. 289-299

Higashijima, S.、Okamoto, H.、Ueno, N.、Hotta, Y. 和 Eguchi, G.：“通过使用斑马鱼的启动子，高频生成在整个肌肉或整个身体中可靠表达 GFP 的转基因斑马鱼

岡本 仁: "ゼブラフィッシュのHox遺伝子から見た脊椎運動の進化と多様化" 生体の科学. 49. 546-554 (1998)

Hitoshi Okamoto：“从斑马鱼的 Hox 基因看出脊柱运动的进化和多样化”生物科学 49. 546-554 (1998)。