MSF/14-3-3蛋白質及びその標的蛋白質との複合体の構造解析

MSF/14-3-3蛋白及其与靶蛋白复合物的结构分析

• 批准号: 08260217
• 负责人: 三原 勝芳
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08260217/
• 关键词: ミトコンドリア; 蛋白質輸送; 14-3-3蛋白質; 分子シャペロン; Hsp70; 輸送促進因子

ラット肝ミトコンドリアへの前駆体蛋白質の輸送過程を解析し、さらにミトコンドリア輸送促進因子MSFと前駆体蛋白質の相互作用の解析を行った。【1】ミトコンドリアへの蛋白質輸送には細胞質とマトリクスのATPと内膜の膜ポテンシャルが要求される。これらのエネルギーを順次除去して輸送を行うことにより。前駆体蛋白質がマトリクスに到達するまでに6種類の輸送中間体を効率よく捕捉する系を組むことに成功し、それらの中間体の性質の解析をおこなった。これによって、外膜と内膜の輸送装置を生化学的に解析する道がひらかれた。【2】ミトコンドリア輸送には細胞質シャペロンであるMSFとHsp70が必要であることを明かにしてきたが、今回は外膜受容体Tom70、Tom20の細胞質領域、Hsp70、MSF、3種類の前駆体蛋白質すべてを精製し、これらを用いて前駆体と受容体の相互作用を水溶液系で解析した。その結果、(1)Tom70への前駆体の結合には、その種類にかかわらずMSFが必要であり、Tom20への前駆体の結合にはHsp70が必要であること(2)これら2種類の受容体は前駆体のミトコンドリア標的シグナルを特異的に認識するがその認識機構は両者で明確に異なること(3)2つの受容体間での前駆体の授受が可逆的であることを明かにした。これによって受容体による前駆体の認識機構を解析することが可能となった。【3】哺乳類ミトコンドリアの受容体としてTom30/metaxinを見いだした。

Liver ミ ラ ッ ト ト コ ン ド リ ア へ の の 駆 body protein before conveying process analytical し を, さ ら に ミ ト コ ン ド リ ア delivery before promoting factor MSF と の 駆 body protein interaction の parsing line を っ た. 【 1 】 ミ ト コ ン ド リ ア へ の protein transport に は cytoplasm と マ ト リ ク ス の ATP と inner の ポ テ ン シ ャ ル が requirements さ れ る. The <s:1> れら, エネ, エネ, ギ, を and を are successively removed from the <s:1>, て, を, う, とによ and とによ lines. Former 駆 body protein が マ ト リ ク ス に reach す る ま で に 6 kinds の transport intermediates を sharper rate よ く capture す る department を group む こ と に successful し, そ れ ら の intermediates の nature の parsing を お こ な っ た. Youdaoplaceholder5 れによって, outer membrane と inner membrane <s:1> transport device を biochemical に analytical する channel がひら がひら れた れた. [2] ミ ト コ ン ド リ ア conveying に は cytoplasm シ ャ ペ ロ ン で あ る MSF と Hsp70 が necessary で あ る こ と を Ming か に し て き た が, today back to は let body Tom70, outer membrane Tom20 の cytoplasmic domain, Hsp70, MSF, before 3 kinds の 駆 body protein す べ て を refined し, こ れ ら を with い て と 駆 body before the body Youdaoplaceholder0 interaction を aqueous solution system で analysis た. そ の results, (1) Tom70 へ の 駆 body before の combining に は, そ の kinds に か か わ ら ず MSF が necessary で あ り, Tom20 へ の 駆 body before の combining に は Hsp70 が necessary で あ る こ と (2) こ れ ら 2 kinds の let body before は 駆 body の ミ ト コ ン ド リ ア mark シ グ ナ ル を specific に know す る が そ の は knowledge institutions Who struck で に clear vision な る こ と (3) 2 つ の by the capacitors between で の 駆 body の before giving が reversible で あ る こ と を Ming か に し た. <s:1> れによって acceptor による pro駆 body <s:1> cognitive mechanism を analysis する とが とが possibly となった. 【3】 Mammalian トコ トコ ドリア ドリア ドリア と てTom30/metaxinを see だ だ だ た.

项目成果

L.C.Armstrong: "Metaxin is a component of a preprotein import complex in the outer membrane of the mammalian mitochondria" J.Biol.Chem.272(in press). (1997)

L.C.Armstrong：“Metaxin 是哺乳动物线粒体外膜中前蛋白输入复合物的一个组成部分”J.Biol.Chem.272（出版中）。

Soh Yamazaki: "Identification and functional characterization of yeast ζ-COP" J.Biochem. 121. 8-14 (1996)

Soh Yamazaki：“酵母 z-COP 的鉴定和功能表征”J.Biochem. 121. 8-14 (1996)

Katsuyoshi Mihara: "Cytosolic factors in mitochondrial protein import" Experientia. 52. 1063-1068 (1996)

Katsuyoshi Mihara：“线粒体蛋白质输入中的胞质因素”Experientia。

Tomoko Kuroiwa: "Reinitiation of protein translocation across the endoplasmic reticulum membrane for the topogenesis of multispanning membrane proteins" J.Biol.Chem.271. 6423-6428 (1996)

Tomoko Kuroiwa：“重新启动跨内质网膜的蛋白质易位，以实现多跨膜蛋白的拓扑发生”J.Biol.Chem.271。

Naotaka Hamasaki & Katsuyoshi Mihara: "Membrane proteins-structure,function and expression control" Karger Press, 413 (1996)

滨崎直隆