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発生工学を応用したα-フェトプロティンの糖鎖構造および機能の解析

利用发育工程分析甲胎蛋白的糖链结构和功能

基本信息

批准号：
08266201
负责人：
西信三
金额：
$ 2.69万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.AFP糖鎖の組織特異性およびがん性変化の解析C_<57>BL_6マウスよりヒトAFP cDNAおよびβ-actin promoter/enhancerを用いて作製したヒトAFPを恒常的に産生するトランスジェニックマウス(TG-3)の種々の組織細胞を培養し、培養上清中のAFPのアイソフォームを4種類の異なるレクチンを用いるレクチンアフィニティー電気泳動で解析した。ConA、LCA、E-PHA、およびallo Aの4種類レクチンを用いた電気泳動で、肝臓、脾臓、脳、腎臓、肺、心臓由来のAFPにそれぞれ数種類のアイソフォームが確認され、組織により微細に糖鎖構造が違うことが明らかになった。肺がんでは、AFPの糖鎖にフコース残基が付加されることによるがん特異的なphenotypeの変化が確認された。2.実験的甲状腺炎モデルを用いたAFPの免疫抑制作用の解析TG-3マウスおよび対照マウスの足踵および下腿皮下に、精製ブタ甲状腺ペルオキシダーゼ(TPO)とアジュバントとのエマルジョンを免疫し甲状腺炎を惹起した。甲状腺炎の発症の有無を組織学的に判定した。また、TG-3マウスおよび対照マウス脾細胞のin vitroにおける各種mitogenに対する幼弱化を、^3H-thymidineの細胞への取り込み量で調べた。TPOを3回免疫した対照マウス8匹中7匹で、弱〜中程度の単核球の湿潤を伴う甲状腺炎が認められたが、TG-3マウスでは8匹中1匹にのみ発症が認められた。AFPは、対照およびTG-3マウスの脾細胞のPHAによる幼若化を濃度依存的に抑制した。しかし、TG-3マウスの脾細胞のPHA応答は対照マウスに比し有意に低下していた。

1. Analysis of tissue specific changes of AFP glycogen lock C_<57>BL_6 and AFP cDNA and β-actin promoter/enhancer C_ BL_6 and AFP cDNA and β-actin promoter/enhancer C_BL_6 and AFP ConA, LCA, E-PHA, and allo A are used in the study of electrokinetic, liver, spleen, kidney, lung, and heart AFP. The mutation of AFP's glycan residues was identified. 2. Analysis of the immunosuppressive effect of AFP in active thyroiditis. TG-3 analysis of AFP in active thyroiditis. TG-3 analysis of AFP in active thyroiditis. The presence or absence of thyroiditis was determined histologically. The amount of TG-3 in the spleen cells is regulated by the mitogen and the amount of H-thymidine. TPO-3 is immune to 7 out of 8, weak to moderate levels of thyroiditis, and 1 out of 8 is immune to thyroid disease. AFP, TG-3, PHA-3, PHA-3, PHA 3, PHA The PHA response to TG-3 in spleen cells was intentionally lower than that in control cells.