mRNAを標的とするオリゴ核酸のドラッグデリバリーシステム

靶向 mRNA 的寡核苷酸药物递送系统

• 批准号: 08266219
• 负责人: 佐藤 智典
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08266219/
• 关键词: 肝癌細胞; 遺伝子導入; PEG脂質; 糖脂質; 糖鎖認識; 共焦点レーザー顕微鏡; ドラッグデリバリーシステム

遺伝子やアンチセンスなどの核酸を細胞内に導入する新規な試薬を合成し、細胞内への導入について検討した。1)DNA/PEG脂質複合体はエンドサイトーシスとは異なるメカニズムで癌細胞に取り込まれていることが示唆された。螢光標識されたDNAを用いた共焦点レーザー顕微鏡による細胞内局在の観察により、DNAは細胞質に局在することが示された。これはDNA/リポフェクチン複合体では細胞内導入後DNAが核に集積するのとは対照的であった。この現象を解明するために、単離された核膜や細胞質成分とDNA複合体との相互作用を検討した。その結果、DNA/PEG脂質複合体は細胞質中で細胞質成分と相互作用することで核内に移行できないことが示された。一方、DNA/リポフェクチン複合体はエンドソームからリリースするときDNAが複合体から遊離するため核に集積できると考えられた。2)糖鎖認識を介した細胞内への選択的な遺伝子導入を行った。DNA/ガラクトース脂質複合体はasialo-glycoprotein receptorを発現しているHepG2細胞に糖鎖特異的に取り込まれた。細胞への取り込み効率は糖鎖認識により支配されているが、β-ガラクトシダーゼのプラスミドを用いた遺伝子発現活性はDNA複合体がカチオン性であることにより高められることが示された。

New DNA synthesis and intracellular DNA introduction techniques for gene transfer 1)DNA/PEG lipid complexes are not suitable for cancer cells. Fluorescent labeling of DNA in common with microscopes The DNA/DNA complex was introduced into the cell and then accumulated in the nucleus. This phenomenon is explained by the interaction between nuclear membrane and cytoplasmic components and DNA complexes. As a result, DNA/PEG lipid complexes interact with cytoplasmic components in the cytoplasm, indicating that they migrate within the nucleus. A DNA/DNA complex is a complex that can be isolated and accumulated. 2)Sugar lock recognition and selection of intracellular proteins The discovery of the DNA/glucuronidase lipid complex and the asialo-glycoprotein receptor in HepG2 cells is a sugarlock-specific target. The gene expression of DNA complex in cell DNA is controlled by the gene expression system.

项目成果

T.Sato: "DNA Hybrid Complexes with Glutamic Acid Derivatives and Their Applications to Gene Transfer" Biomedical Functions and Biotechnology of Natural and Artificial Polvmers. 135-144 (1996)

T.Sato：“DNA 杂合复合物与谷氨酸衍生物及其在基因转移中的应用”天然和人造聚合物的生物医学功能和生物技术。

T.Sato: "Formation of A DNA/polygalacto-samine Complex and Its Interaction with Cells" Chem Lett. 725-726 (1996)

T.Sato：“DNA/聚半乳糖胺复合物的形成及其与细胞的相互作用”Chem Lett。

T.Sato: "Preparation of a DNA Complex with Lipoglutamide having Tetraethylene Glycol Tails and Its Application to DNA Delivery into Tumor Cells" Bull.Chem.Soc.Jpn. 2335-2340 (1996)

T.Sato：“具有四甘醇尾部的脂谷酰胺的 DNA 复合物的制备及其在将 DNA 递送至肿瘤细胞中的应用”Bull.Chem.Soc.Jpn。