EBウイルスベクターを用いたエイズワクチンに関する研究

利用EB病毒载体进行艾滋病疫苗的研究

• 批准号: 08269202
• 负责人: 今井 章介
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08269202/
• 关键词: EBウイルス; エイズ; ワクチン; 遺伝子治療; ウイルスベクター

われわれは世界で初めてEBV増殖に許容性の細胞を分離し、EBVベクターによる遺伝子導入法を確立した。本研究の目的はこの新たに確立したEBVベクター系を用いてHIV特異的CTLを誘導し、エイズに対する特異的免疫療法を開発することである。今年度は以下の研究を行った。EBウイルスのEco-RI-B断片の中心部分へバクテリオファージP1.loxP配列、ネオマイシン抵抗性遺伝子を持つ組み換え用プラスミドを作製した。次いで本プラスミドをEBV要請Akata細胞へトランスフェクトし、標的部分で相同組み換えの起こった細胞クローンを分離した。得られた細胞クローンが組み換えEBVを産生することをサザーンブロット法で確認した。この組み換えウイルスCreをは一過性に発現させることにより、loxP配列を持つ外来DNAを容易にloxP部位へ挿入することができる。現在、感栄性粒子を産生しないようなHIVプロウイルス変異体、gpt遺伝子及びloxP配列を含むプラスミドを作製し、loxP組み換えEBVを持つAkata細胞へトランスフェクトし、HIV組み込みEBVを作整中である。

In the early days of EBV propagation, a method for isolation of permissive cells and introduction of EBV genes was established. The aim of this study is to establish a new EBV system for the induction of HIV-specific CTLs and the development of HIV-specific immunotherapy. This year, the following research was conducted. Eco-RI-B fragment center part of the EB protein sequence is called P1.loxP alignment, and the resistance gene sequence is called P1.loxP alignment. In the second place, the EBV is required to be isolated from Akata cells. This is confirmed by the support network method that the obtained cell clones can be assembled and EBV is produced. These components are transiently detected, and loxP alignment is easy to incorporate into foreign DNA. At present, the production of sensitive particles includes the control of HIV protein, gpt protein and loxP sequence, the conversion of loxP group into EBV, the integration of Akata cell protein and HIV group into EBV.

项目成果

Shimizu, N.: "Clonal propagation of Epstein-Barr virus (EBV) recombinants in EBV-negative Akata cells" J. Virol.70. 7260-7263 (1996)

Shimizu, N.：“Epstein-Barr 病毒 (EBV) 重组体在 EBV 阴性 Akata 细胞中的克隆繁殖”J. Virol.70。

Wen, S.: "Assosiation of Epstein-Barr virus (EBV) with Sjogren's syndrome : differential EBV expression between epithelial cells and lymphocytes in salivary glands.21GC05:Am. J. Pathol." 149. 1511-1517 (1996)

Wen, S.：“EB 病毒 (EBV) 与干燥综合征的关联：唾液腺上皮细胞和淋巴细胞之间 EBV 表达的差异。21GC05：Am. J. Pathol。”

Sugiura, M.: "Transcriptional analysis of Epstein-Barr virussgene expression in EBV-positive gastric carcinoma : unique viral latency in the tumour cells" BrJ Cancer. 74. 625-631 (1996)

Sugiura, M.：“EBV 阳性胃癌中 Epstein-Barr 病毒基因表达的转录分析：肿瘤细胞中独特的病毒潜伏期”BrJ Cancer。

Yoshiyama, H.: "Epstein-Barr virus infection to human gastric carcinoma cells : implication of the existance of a new virus receptor different from CD21." J. Virol. 70. 7260-7263 (1996)

Yoshiyama, H.：“Epstein-Barr 病毒感染人胃癌细胞：暗示存在不同于 CD21 的新病毒受体。”

Imai, S.: "Epstein-Barr virus-carring and -expressing T-cell lines established from severe chronic active EBV infection." Blood. 87(4). 1446-1457 (1996)

Imai, S.：“由严重慢性活动性 EBV 感染建立的携带和表达 Epstein-Barr 病毒的 T 细胞系。”